卢滔 方敏 彭春仙 卢伟力 吴志宇
[摘要] 意图 探討产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床感染散布特色及中西医结合的干涉效果。 办法 搜集临床多个科室标本，共筛查出产KPC酶肺炎克雷伯菌株523株，剖析其临床散布状况及病区散布状况。将装备好的头孢三嗪、鱼腥草注射液、穿琥宁注射液别离独自或与西药配伍参加恰当浓度的产KPC酶肺炎克雷伯菌落中，经动态比浊法测定内毒素含量。 成果 在临床别离出的523例产KPC酶肺炎克雷伯菌株中，来自于呼吸道标本所占的比率最高，其次为中段尿液、脓液及创伤排泄物、血液。在各标本中产ESBLs阳性率最高的为呼吸道标本，其次为脓液及创伤排泄物、血液、中段尿液。产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床病区散布状况：呼吸科所占比率最高，其次为ICU、感染科、泌尿外科。产ESBLs状况也存在显着差异，ICU所占百分比最高，其次为肿瘤科、呼吸科、感染科。鱼腥草组、穿琥宁组及与西药配伍组内毒素发作的量均显着低于西药组（P<0.01）。 定论 产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床散布有必定特色，中药抗菌药物配伍西药对产KPC酶肺炎克雷伯菌内毒素的开释有显着的抑制效果。
[关键词] 肺炎克雷伯菌；肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯酶；内毒素；感染
[中图分类号] R446.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）03-0015-04
Characteristics of infection distribution of KPC-producing klebsiella pneumoniae and its inhibitory effect on integrated traditional Chinese medicine and western medicine
LU Tao1 FANG Min2 PENG Chunxian1 LU Weili1 WU Zhiyu1
1.Department of Infection， Quzhou People's Hospital in Zhejiang Province， Quzhou 324000， China； 2.Department of Oncology， Quzhou Kecheng District People's Hospital in Zhejiang Province， Quzhou 324000， China
[Abstract] Objective To investigate the characteristics of infection distribution of KPC-producing Klebsiella pneumoniae and its intervention effect of integrated traditional Chinese and western medicine. Methods A total of 523 strains of KPC-producing Klebsiella pneumoniae were screened from various clinical departments， and its clinical distribution and distribution of disease areas were analyzed. Ceftriaxone， Houttuynia injection， and Chuanhuning injection which were well-prepared were added into appropriate concentration of KPC-produing Klebsiella pneumoniae colony alone or combined with western medicine. The endotoxin content was determined by dynamic turbidimetry. Results In the clinically isolated 523 cases of KPC-producing Klebsiella pneumoniae strains， the highest proportion was from respiratory specimens， followed by the middle segment of urine， pus， wound secretions， blood. The highest ESBLs-producing positive rate in each specimen was from respiratory specimens， followed by pus， wound secretions， blood， middle segment of urine. The distribution of clinical ward of KDS-producing Klebsiella pneumoniae： Respiratory rate accounted for the highest rate， followed by ICU， department of infectious diseases， and urology. ESBLs production was significantly different. ICU accounted for the highest percentage， followed by the Department of Oncology， Respiratory Medicine， and Infectious Diseases. The amount of endotoxin produced in Houttuynia group， Chuanhuning group and integrated western medicine group was all significantly lower than that in western medicine group（P<0.01）. Conclusion The clinical distribution of KPC-producing Klebsiella pneumoniae has certain characteristics. Anti-bacterial Chinese medicine combined with Western medicine has a significant inhibitory effect on the release of endotoxin in KPC-producing Klebsiella pneumoniae.
[Key words] Klebsiella pneumoniae； Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae （KPC）； Endotoxin； Infection
临床抗生素的运用可以使某些致病菌发作超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），发作ESBLs后的细菌简单发作多重耐药性，肺炎克雷伯菌就是其间的一种。肺炎克雷伯菌是一种条件致病菌，毒力较低但临床较为常见[1]。产肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯酶（KPC）肺炎克雷伯菌是在本世纪初发现的，KPC酶能水解大部分β-内酰胺类抗菌药物，产KPC菌株一般因为发作ESBLs而对抗菌药物发作多重耐药性[2]。因而加强对产KPC酶肺炎克雷伯菌感染的监测及医治研讨关于临床相应疾病的医治及防备都至关重要。
1 材料与办法
1.1 一般材料
搜集2011年3月～2014年5月期间本院临床多个科室不同患者的呼吸道（1352例）、尿液（325例）、血液（279例）、脓液（311例）、排泄物（223例），其他（70例）等標本2560例。
1.2 实验办法
1.2.1 菌株筛查 搜集到的临床标本中，别离的疑似产KPC酶肺炎克雷伯菌均经药敏判定体系进行相关检测，惯例质控菌株为大肠埃希菌（ATCC25922）。别离出523株肺炎克雷伯菌株，均经PCR扩增和DNA测序承认含有KPC-2型酶基因。选用半自动细菌剖析体系进行疑似产ESBLs肺炎克雷伯菌筛检。523株肺炎克雷伯菌株筛查出产ESBLs菌株188株，后经PCT扩增和DNA测序承认，基因型包含CTX-M型125株和SHV型63株。
1.2.2 细菌内毒素开释实验 将产KPC酶肺炎克雷伯菌接种于MH琼脂板中，35℃孵育12 h，取单个菌落接种于生理盐水中，经比浊法将含菌量控制在0.5 CFU/mL左右。选用二倍稀释法测得头孢三嗪对产KPC酶肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度为0.063 mg/mL。装备10倍最低抑菌浓度的头孢三嗪溶液，别离与新鱼腥草素钠注射液、穿琥宁注射液配伍，别离参加产KPC酶肺炎克雷伯菌落中。置于35℃培育箱培育4 h，经动态比浊法测定内毒素含量。
将参加头孢三嗪的样本设为西药组，参加鱼腥草注射液的样本设为鱼腥草组，参加穿琥宁注射液的样本设为穿琥宁组，参加头孢三嗪配伍鱼腥草的样本设为西药+鱼腥草组，参加头孢三嗪配伍穿琥宁的样本设为西药+穿琥宁组。每组均随机取20个样本数据，每个样本测定3管，取平均值。
1.3 调查目标
剖析产KPC酶肺炎克雷伯菌临床标本的散布状况及病区散布状况。在产KPC酶肺炎克雷伯菌开释内毒素实验中，比较各组内毒素的开释量，以调查药物对人体的影响。
1.4 计算学办法
实验数据运用SPSS22.0软件剖析，计量材料用（x±s）标明，行方差齐性剖析，均方差齐，两样本比较选用t查验，P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
2.1 产KPC酶肺炎克雷伯菌临床标本散布
表1中可见产KPC酶肺炎克雷伯菌株的散布，及相应产ESBLs株数。在临床别离出的523例产KPC酶肺炎克雷伯菌株中，来自于呼吸道标本所占的比率最高，其次为中段尿液、脓液及创伤排泄物、血液。在各标本中产ESBLs阳性率最高的为呼吸道标本，其次为脓液及创伤排泄物、血液、中段尿液。
2.2 产KPC酶肺炎克雷伯菌临床病区散布
表2中可见产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床病区散布状况。其间呼吸科所占比率最高，其次为ICU、感染科、泌尿外科。经计算，各科室标本产ESBLs状况也存在显着差异，ICU所占百分比最高，其次为肿瘤科、呼吸科、感染科。
2.3 产KPC酶肺炎克雷伯菌开释内毒素实验
产KPC酶肺炎克雷伯菌开释内毒素实验成果显现，组间内毒素含量比较差异有计算学含义（P<0.05）。单纯中药组（鱼腥草组、穿琥宁组）、中西医结合用药组（西药+鱼腥草组、西药+穿琥宁组）内毒素发作的量均显着低于西药组，经比较差异均有计算学含义（P<0.01）。中西医结合用药组（西药+鱼腥草组、西药+穿琥宁组）的内毒素产值与中药组（鱼腥草组、穿琥宁组）比较，差异无计算学含义（P>0.05）。见表3。
3 评论
肺炎克雷伯菌归于革兰阴性杆菌，是导致医源性感染的重要致病菌，一般存在于呼吸道、肠道。产KPC酶肺炎克雷伯菌近年来检出率敏捷添加，有研讨[3-4]称产KPC酶肺炎克雷伯菌可以导致医院内爆发性感染。因而加强对产KPC酶肺炎克雷伯菌感染的监控和灭菌研讨一直是临床研讨的热门。
本研讨在临床多个科室搜集的呼吸道、尿液、血液、脓液、排泄物等标本中共别离出523株产KPC酶肺炎克雷伯菌株。其间，呼吸科供给的标本中肺炎克雷伯菌感染的所占比率最高，在痰液标本中产KPC酶肺炎克雷伯菌株的检出率也最高。剖析原因，可能是因为患者机体抵抗力下降时，口咽部正常菌群遭到损坏后进入呼吸道引起肺部感染所造成的。除此以外，运用呼吸机的患者还可发作肺炎克雷伯菌旅居消化道的现象，简单发作至下呼吸道的逆行，引发医院感染性肺炎。在列入研讨的各病区中，ICU的产ESBLs阳性率最高（50.41%），可能是因为ICU患者具有住院时间长、频频侵入性操作、机体免疫力低下、长期运用抗生素等原因。
头孢三嗪归于第三代头孢菌素类抗生素，可以与青霉素结合蛋白相结合，影响细菌细胞壁的组成进程，导致细菌中止割裂的一起，诱导细菌内毒素开释进而发挥抗菌效果[5]。许多研讨[6]标明，头孢三嗪可以显着促进产KPC酶肺炎克雷伯菌开释内毒素。内毒素的主要成分是革兰阴性菌细胞壁外膜的脂多糖成分，可以诱导体内很多细胞因子发作，触发炎症级联反响。抗菌药物杀灭细菌的一起，也导致了体内的内毒素水平添加，简单导致高内毒素血症，患者死亡率添加[7-8]。因而，寻觅高效、低毒的抗内毒素药物一直是临床研讨的热门。
在我国，关于中医药在抗内毒素方面的研讨日益广泛，研讨[9-11]证明，清热解毒效果的中药在抗内毒素方面效果显着。本研讨挑选了鱼腥草、穿琥宁两种清热解毒药物，别离选用独自和西药配伍计划运用于产KPC酶肺炎克雷伯菌的抗感染研讨中。鱼腥草来源于三白草科植物，能清热解毒、消肿疗疮、利尿除湿、清热止痢，现代药理学证明鱼腥草具有抗菌、抗病毒等效果[12-14]。穿琥宁归于免疫体系用药，对细菌内毒素引起的发热有较强的解热效果[15-17]。本研讨发现，单纯中药组及中西医配伍组的产KPC酶肺炎克雷伯菌开释内毒素的量均显着低于西药组，这与其他学者的研讨根本共同，也证明了中药在抗内毒素方面的显著效果。
综上所述，本研讨关于产KPC肺炎克雷伯菌的临床散布特色有了开始的知道，往后关于相应的灭菌作业可以愈加有针对性地展开。在往后的研讨中，将拟定并履行相关灭菌守则和操作，以期减少产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床感染发作率。中药与西药配伍后关于产KPC酶肺炎克雷伯菌的产内毒素效应有显着的抑制效果，理论上可以下降内毒素开释入血的浓度[18-20]，往后将展开相关研讨，讨论中药关于KPC肺炎克雷伯菌感染相关疾病方面的临床效果及预后。
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（收稿日期：2017-08-31）
