谢娜 陈志敏
[摘要] 意图 评论肺炎支原体感染儿童血清免疫相关目标的改变及临床含义。办法 挑选肺炎支原体感染患儿30例作为肺炎支原体感染组，健康儿童30例作为对照组。检测两组血清免疫目标水平，剖析两组之间的差异。 成果肺炎支原体组IgG水平低于对照组（P<0.05），IgM、IgE、IL-18、嗜酸性粒细胞水平高于对照组（P<0.05或许P<0.01）。肺炎支原体感染患儿血清IL-18水平与IgE 呈正相关（r=0.401，P<0.05）。定论 肺炎支原体感染患儿血清IL-18、IgE、IgM和外周血管嗜酸性粒细胞升高，IL-18与IgE呈正相关。
[关键词] 肺炎支原体；血清；细胞介素-18
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）08-0104-04
肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体，是常见的社区取得性肺部感染的病原体，是介于细菌和病毒之间的一组病原体，肺炎支原体感染多见于婴幼儿和青少年[1]。肺炎支原体发病机制还不十分明确，研讨以为，其与机体的免疫存在必定的相关性，患者感染后存在细胞免疫、体液免疫、免疫调度、免疫逃逸、免疫抑制等[2]。也有研讨以为支原体感染后导致Ⅲ型超敏反响。本研讨首要剖析肺炎支原体感染儿童血清免疫相关目标的改变及临床含义，现报导如下。
1材料与办法
1.1一般材料
挑选2012年9月～2013年3月收治的下呼吸道支原体感染患儿30例和健康儿童30例。肺炎支原体组中男16例，女14例，平均年龄（7.9±2.3）岁。归入规范：①影响性咳嗽为首要体现，可伴发热或许无发热；② 肺部体征可不显着，部分患者可闻及干啰音或许湿啰音；③肺部印象学查看成果契合肺炎支原体感染的体现；④肺炎支原体抗体阳性；⑤冷凝聚试验≥1：32；⑥无免疫性疾病，无关节胀痛、不明原因的发热；⑦近1个月内无感染症状；⑧无长时间服用糖皮质激素史或许近期服用糖皮质激素，近期无服用影响免疫调度的药物。对照组30例，男15例，女15例，平均年龄（8.2±3.1）岁，为在我院进行健康体检的儿童。归入规范：①无免疫性疾病，无关节胀痛、不明原因的发热；②近1个月内无感染症状；③无长时间服用糖皮质激素史或许近期服用糖皮质激素，近期无服用影响免疫调度的药物；④ 血常规以及胸部X光查看正常。
1.2检测办法及检测目标
1.2.1标本制备 收集研讨目标空腹静脉血4 mL。非抗凝，3000 r/min离心5 min，取上清液，-20℃保存，待测IgG、IgM、IgA、IL-8。取0.5 mL抗凝，用于测嗜酸性粒细胞。
1.2.2 IgG检测 选用免疫透射比浊法进行检测。取标本血清0.1 mL，加1 mL生理盐水进行稀释。别离取2个抗体液1 mL，别离参加10 μL的稀释血清和规范血清，混匀，37℃下水浴，30 min后波长340 nm比浊，读取吸光度。
1.2.3 IgA检测 选用免疫透射比浊法进行检测。取标本血清0.1 mL，加1 mL生理盐水进行稀释，别离取2个抗体液1 mL，别离参加稀释血清40 μL和规范血清40 μL，混匀后37℃水浴，30 min后，波长340 nm比浊，读取吸光度。
1.2.4 IgM检测 选用免疫透射比浊法进行检测。取标本血清0.1 mL，参加1 mL生理盐水稀释。取抗体液1 mL 2份，别离参加80 μL的稀释血清和80 μL的规范血清，混匀后37℃水浴，30 min后波长340 nm读取吸光度。
1.2.5 IgE检测 选用EIA法进行检测。试验前对标本等在室温下进行平衡，高值标本进行稀释，装备洗液。在反响板参加不同浓度的规范品25μL、质控血清以及标本血清25μL。每孔均参加缓冲液100μL，混匀，室温下反响15 min。弃各孔液体，洗液冲刷5次。每孔加酶结合物100μL，混匀，室温下反响20 min。弃各孔液，冲刷5次，拍净残液。每孔加显色液A和B各1滴，置室温下避光15 min，每孔加停止液1滴，混匀，30 min内，波长450 nm读取吸光度，核算对应的浓度。
1.2.6 IL-18 检测 选用ELISA办法进行检测。取100 μL待测样板至抗体包被的微孔板中，室温下孵育60 min。洗刷后铲除洗刷液，每孔中加耦合液100 μL，室温下孵育60 min。弃孔内容物，洗刷，铲除洗刷液后，每孔中加酶效果底物100 μL，室温下孵育30 min。每孔加停止液100 μL。波长450 nm读出吸光度，校对波长620 nm，核算浓度。
1.2.7嗜酸性粒细胞计数 取嗜酸性粒细胞稀释液0.38 mL参加试管中，另取10 μL抗凝全血参加试管中，混匀，放置5 min，混匀后滴入计数板，放置5 min，计数。
1.3统计学办法
选用SPSS12.0统计学软件对数据进行剖析，计数材料选用χ2查验，计量材料选用t查验，相关性剖析选用Pearson相关剖析。P<0.05为差异有统计学含义。
2成果
2.1两组检测成果比较
肺炎支原体组IgG水平低于对照组（P<0.05），IgM、IgE、IL-18、嗜酸性粒细胞水平高于对照组（P<0.05或P<0.01）。见表1。
2.2肺炎支原体感染患儿IgE、IL-18、嗜酸性粒细胞的相关性
肺炎支原体感染患儿血清IL-18水平与嗜酸粒细胞无相关性（r=0.066，P>0.05），与IgE 呈正相关（r=0.799，P<0.05），见图1。IgE与嗜酸粒细胞无相关性（r=0.131，P>0.05）。
3评论
肺炎支原体是社区取得性肺炎的常见病原体，好发于学龄儿童和青少年，患者以影响性咳嗽为典型的临床体现，多伴有发热，也可不伴发热，病变常累及单侧肺，也可见双侧肺、肺泡滋润导致肺叶的实变。研讨显现，肺炎支原体感染呈现的免疫紊乱与哮喘的发生和拖延密切相关。肺炎支原体感染除了累及肺部，还可呈现全身各体系症状，有的患儿乃至仅体现为肺外危害。肺炎支原体感染最常见的肺外功用受损是神经体系，中枢神经体系劳累体现为脑炎、脑膜脑炎、无菌性脑膜炎，周围神经体系可体现为急性播散性脑脊髓、多发性神经根炎、Fischer综合征、格林·巴利综合征等[3-6]。研讨显现，免疫要素在肺炎支原体致病机制中发挥了重要的效果[7]。肺炎支原体感染还可累及血液体系，呈现白细胞、红细胞、血小板计数反常和溶血性贫血、血小板削减性紫癜、高凝等。曾有报导肺炎支原体感染患儿呈现血小板、中性粒细胞削减，Coombs试验阳性，阐明红细胞或许血清中有本身抗体，还检测出抗中性粒细胞抗血小板抗体，阐明支原体诱导了本身抗体的发生。皮肤黏膜并发症首要体现为皮疹。有学者以为与超抗原有关，肺炎支原体直接与Ⅱ型安排相容性分子效果，激活多克隆T细胞，促进开释很多细胞因子。肺炎支原体抗体可引起无菌性关节炎，患者呈现低丙种球蛋白血症。其他还有心肌炎、心内膜炎、心包炎。endprint
肺炎支原体的致病机制首要有直接侵袭、抗原抗体免疫复合物反响、细胞因子介导的安排危害、肺炎支原体的细胞毒素效果、肺炎支原体代谢产品致病等。肺炎支原体进入抗原提呈细胞内，在这些细胞外表表达肺炎支原体抗原分子，抗原呈递给T细胞，诱导T细胞分化为T1、T2细胞，组成排泄INF-α，INF-γ，IL-1、2、4、5、6、8、10、12、18，细胞因子产品和淋巴细胞激活可导致保护性抗炎症反响效果，但过度激活和开释会导致免疫功用危害。肺炎支原体与肺、心、脑、肾、肝等具有一起抗原，肺炎支原体感染后，淋巴细胞发生本身特异性抗体，构成免疫复合物，激活很多补体，导致白细胞趋化、侵入病变部位，开释溶菌酶中的水解酶，导致增生和损坏。现在遍及研讨以为肺炎支原体感染的患者存在免疫危害。
IL-18是一种新发现的致炎细胞因子，由于它在结构活化进程受体复合物、信号转导等方面与IL-1β具有类似性，故已经成为逐步强壮的IL-1细胞因子宗族的一个新成员。IL-18有强壮的影响TH细胞发生IFN-γ的活性，因而命名为γ干扰素诱导的因子，它首要由激活的巨噬细胞发生，诱导IL-18发生的影响要素有感染、应激等。IL-18与感染、肿瘤、本身免疫性疾病均有相关性。在本次研讨中，感染肺炎支原体患儿血清IL-18的水平显着高于对照组，这与既往的一些研讨类似。刘丽辉等[8]研讨成果显现，IL-18参加了MP的发生、开展。张静等[9]研讨成果显现，重症MPP中TH1反响占优势，过度细胞免疫反响引起全身性的免疫的危害，形成相应临床症状。IL-18及sIL-2R发挥了重要的介导效果。张培森等[10]研讨显现支原体CNS危害组患儿与对照组脑脊液IL-18水平比较，差异有统计学含义（P<0.05）。且支原体CNS危害早发组患儿脑脊液IL-18水平与迟发组患儿脑脊液IL-18水平比较，差异具有统计学含义（P<0.05）。芦爱萍等[11]研讨成果显现，肺炎支原体感染患儿血中IgE、IL-13与IL-18显着高于对照组。IL-18是一种单核因子，功用与IL-12类似[12]。首要由活化的单核-巨噬细胞发生。诱导T细胞和NK细胞发生IFN-γ，是IL-18首要的功用之一，其还能促进多种促炎细胞因子、细胞毒效应因子的发生，促进Th1类细胞的增殖，增强细胞毒效果。还能够促进Th2细胞出产，诱导其排泄细胞因子，调度免疫反响[13]。
免疫球蛋白归于球蛋白，由浆细胞组成和排泄，能与抗原发生特异性结合，是一种重要免疫分子，首要经过补体介导的细胞毒效果和抗体依靠的细胞介导的细胞毒效果等发挥效果。最近有学者证明，除了B淋巴细胞和浆细胞能排泄免疫球蛋白，一些肿瘤细胞及部分正常的上皮细胞可发生必定量的免疫球蛋白。IgG具有中和游离外毒素和病毒的效果，能够调度吞噬细胞的功用[14]。IgA具有抗菌、抗毒素、抗病毒[15]效果，可能对支原体和一些真菌也有必定的效果，既往对肺炎支原体感染影响血清免疫球蛋白水平的研讨成果也不尽相同，有的报导以为血清免疫球蛋白升高，有的学者以为支原体感染患儿免疫球蛋白下降。在本次研讨中，肺炎支原体感染的患儿IgG水平显着低于对照组，IgA 水平差异不显着，IgE和IgM水平则高于对照组。IgG呈现升高相对较晚，因而前期采血检测可能并不升高，而且其下降也反映了患儿自我免疫防护功用相对较差。通常在支原体感染后1～2周内，首要发生IgM和IgA。本次研讨中，患儿首要以IgM升高为主，阐明患儿B淋巴细胞功用亢进。
细胞因子与肺炎支原体感染具有相关性，在肺炎支原体感染进程中T细胞和B细胞均发挥了显着的效果[16，17]。诱导T细胞和NK细胞发生IFN-γ是IL-18重要的生物学功用之一。IL-18和IL-12具有协同效应，而且IL-18的效果强于后者。IL-18与感染、肿瘤、本身免疫性疾病均有相关性。在本次研讨中，支原体感染患儿血清IL-18水平显着高于健康对照组的儿童，阐明其参加了肺炎支原体感染，在支原体感染的免疫相关发病机制中发挥了必定的效果。
有研讨显现，支原体感染与哮喘的发生具有必定的相关性，在本次的研讨中，支原体感染患儿血清IgE水平显着高于对照组，也提示支原体感染可能会诱发咳嗽变异性哮喘。肺炎支原体可能作为一种抗原，经过激起迟发型和速发型变态反响，然后诱发哮喘。支原体感染患儿存在Th1细胞功用下调，Th2细胞功用亢进，这与哮喘的发病机制类似。本次研讨还发现，IL-18与IgE呈正相关，阐明两者之间存在必定联系，可是IL-18是否诱导IgE组成，还待进一步研讨。哮喘别的一个常见的变态反响目标是外周血嗜酸性粒细胞（EOS）。在本次研讨中，支原体感染患儿外周血嗜酸性粒细胞计数显着高于健康对照儿童，这也支撑肺炎支原体感染后诱发哮喘的研讨成果。提示肺炎支原体感染能够促进外周嗜酸性粒细胞的增殖，功用增强。但相关性研讨成果显现，其与IL-18没有显着的相关性，可是否表明血清IL-18不能诱导外周血管嗜酸性粒细胞的增殖还需要进一步的研讨。尽管患儿血清IgE和外周血管嗜酸性粒细胞均有升高，可是两者之间并没有相关性。
综上所述，肺炎支原体感染患儿血清IL-18、IgE、IgM和外周血管嗜酸性粒细胞升高，IL-18与IgE呈正相关。阐明IL-18参加了肺炎支原体感染，而且肺炎支原体感染与哮喘发生可能存在必定的相关性。
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