余卫东 蔡育波 刘琼茹等
[摘要] 意图 评论细胞块切片免疫组化染色使用于胸腔积液病理确诊的临床作用。 办法 挑选本院收治的60例胸腔积液患者作为研讨目标，别离选用细胞块切片免疫组化染色检测和惯例细胞涂片检测，检测患者的CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA、Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin等目标表达，对区分确诊肺腺癌和间皮病变的相关免疫符号组化进行挑选。 成果 两组胸腔积液的阳性检出率比较，P<0.05。细胞块切片免疫组化染色检测分型确诊恶性胸腔积液的契合率高达96.67%，通过组合性抗体检测发现，间皮病变呈现Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin目标高表达，而肺腺癌则呈现CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA目标高表达，显现细胞块切片免疫组化染色检测显着优于惯例细胞涂片检测（P<0.01）。 定论 在恰当的抗体组合下，胸腔积液细胞块切片结合免疫组化染色检测对肺腺癌和间皮瘤等恶性胸腔积液具有十分的病理区分确诊作用，值得临床推行。
[要害词] 胸腔积液；细胞块切片；细胞涂片；免疫组化；病理确诊
[中图分类号] R446.8 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）12-0127-03
[Abstract] Objective To explore the clinical effect of cell block slice immunohistochemical staining was applied to pathologic diagnosis of pleural effusion. Methods Selected 60 patients with pleural effusion were treated at our hospital as the research object， the cell block slice immunohistochemical staining were used respectively to test and conventional smear test， the testing of patient CK7，CD15，MOC-31，BerEP4， TTF-1，CEA，Calretinin，WT-1， CK5/6， Desmin index expression， such as for differential diagnosis between skin lesions of lung adenocarcinoma and filtered immune markers related to network stations. Results The two positive rate of pleural effusion compared， P<0.05. Cell block sections immunohistochemical staining typing diagnosis of malignant pleural effusion compliance rate of 96.67%， after a combination of antibodies detected， mesothelial lesions showed Calretinin， WT-1， CK5/6， Desmin indicators of high expression the lung cancer was showing CK7， CD15， MOC-31， BerEP4， TTF-1， CEA indicators of high expression， indicating cell block sections immunohistochemical staining was significantly better than conventional smear test（P <0.01）. Conclusion The under the appropriate combination of antibody， pleural effusion cells block biopsy combined with immunohistochemical staining detection for such as lung adenocarcinoma and mesothelioma pathological differential diagnosis of malignant pleural effusion is very effect， worth clinical promotion.
[Key words] Pleural effusion； Cell block sections； Smears； Immunohistochemistry； Pathological diagnosis
一直以来，浆膜腔积液的细胞病理学确诊具有十分重要的临床含义。传统上，浆膜腔积液的临床确诊首要运用细胞涂片法，可是细胞涂片检测的灵敏度比较低，仅为50.0%～78.0%[1-3]。这是因为在细胞涂片检测进程中，因为浆膜腔原发性间皮性肿瘤与转移性癌症的细胞形状比较类似，因而很难作为细胞病理区分确诊[4，5]。在临床进程中，对间皮性肿瘤与转移性癌症的区别关系到临床医师的医治计划挑选和断定，因而对间皮性肿瘤与转移性癌症进行区分确诊的含义十分严峻，尤其是关于肺腺癌和恶性间皮瘤的区分确诊。为此，为了解胸腔积液细胞块切片免疫组化染色的病理确诊办法，评论细胞块切片免疫组化染色使用于胸腔积液病理确诊的临床作用，挑选本院2011年6月～2013年6月60例胸腔积液患者作为调查目标，比照研讨细胞涂片法与细胞块切片结合免疫组化染色法对胸腔积液的区分确诊效能，以寻觅对胸腔积液进行病理区分确诊的最有用办法，现报导如下。endprint
1材料与办法
1.1一般材料
挑选本院2011年6月～2013年6月呼吸内科门诊所接纳的60例胸腔积液患者。其间，男36例，女24例，年纪20～72岁，均匀（47.6±15.7）岁。一切患者送检标本均为胸腔积液，每例患者均进行细胞涂片和细胞块切片制造。一切患者通过临床特征加印象学查看均确诊为恶性胸腔积液，本研讨均征得患者及其家族赞同，并签署试验意见书。
1.2办法
1.2.1标本制备 一切细胞涂片和细胞块标本均取10 mL，分为3～5个管，运用离心机别离沉渣后制成HE涂片，离心率为3 000 r/min，别离时刻为10 min。然后将别离后剩余的沉渣运用试镜纸进行包裹，固定在10%福尔马林中性固定液中，通过惯例的处理后制备成细胞蜡块，然后进行细胞接连切片，切片厚度为3～4 μm。一切细胞涂片和细胞块切片别离进行HE染色和免疫组化染色。
1.2.2 HE染色标本调查[6] 一切调查进程由两位具有高级职称的病理医师进行调查。依据标本中的细胞形状、黏附性以及核不典型性，假如呈现反响性增生间皮细胞，细胞的弥散性好，无不典型性，比较温文则为良性；假如细胞成团，核具有严峻不典型性，细胞形状严峻不温文则为恶性；假如细胞弥散，核中-重度不典型性，或者是细胞成团，核中-轻度不典型性则为不能必定。
1.2.3免疫组化染色标本调查[7] 运用S-P法，Maxvision试剂盒，DAB显色试剂；抗体挑选为CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA、Calretinin、WT-1，CK5/6、Desmin。一切操作依照阐明书进行。判别规范为：CK7、BerEP4、CEA、MOC-31、CK5/6、Desmin细胞质染色呈棕黄色为阳性，WT-1、TTF-1细胞核呈棕黄色为阳性，Calretinin的细胞核和细胞质均显色为阳性，CD15细胞膜和细胞质染色为阳性。
1.3统计学办法
选用SPSS15.0软件进行统计学处理，计数材料行χ2查验，P<0.05为差异有统计学含义。
2成果
2.1两组检测阳性比较
两组胸腔积液的阳性检出率比较，差异有统计学含义（χ2=32.935，P<0.05），见表1。
2.2两组病理确诊成果比较
细胞块切片免疫组化染色检测分型确诊恶性胸腔积液的契合率高达96.67%，通过组合性抗体检测发现，间皮病变呈现Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin目标高表达，而肺腺癌则呈现CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA目标高表达，显现细胞块切片免疫组化染色检测显着优于惯例细胞涂片检测，两组比较差异有高度统计学含义（P<0.01），见表2。
3评论
浆膜腔积液的细胞病理学确诊有十分重要的临床含义。因为胸腔积液细胞学查看的样本收集比较简略，制备比较简略方便，因而细胞涂片法早已用于病理学查看。可是，传统运用细胞涂片法在浆膜腔积液的临床确诊检测中的灵敏度比较低，一般仅为50.0%～78.0%[8，9]。这首要是因为在细胞涂片检测进程中，浆膜腔原发性间皮性肿瘤与转移性癌症的细胞形状比较类似，因而很难作为细胞病理区分确诊。这种因胸腔积液细胞成分比较复杂而导致的细胞形状的类似性给经HE染色的惯例离心涂片用于判别胸腔积液的性质添加了难度[10]。尤其是关于间皮性肿瘤与转移性癌症，其细胞形状十分类似，以致于很难运用单纯的细胞涂片检测将其进行区别。但是在临床进程中，对间皮性肿瘤与转移性癌症的区别关系到临床医师的医治计划挑选和断定，因而对间皮性肿瘤与转移性癌症进行区分确诊的含义十分严峻，尤其是关于肺腺癌和恶性间皮瘤的区分确诊。从本文的剖析来看，本组存在14例无法判别胸腔积液是否良性。能够看出，细胞涂片HE染色检测现在还存在许多缺乏。
从上文的剖析来看，细胞块切片免疫组化染色对胸腔积液的阳性检出率为100%，远高于仅单纯性运用细胞涂片HE染色检测组（P<0.05）。并且，通过剖析成果显现，细胞块切片免疫组化染色检测分型确诊恶性胸腔积液的契合率高达96.67%，通过进行组合性抗体检测发现，间皮病变呈现Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin目标高表达，而肺腺癌则呈现CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA目标高表达，显现细胞块切片免疫组化染色检测显着优于惯例细胞涂片检测（P<0.01），阐明细胞块切片免疫组化染色不管在病理确诊的灵敏性仍是特异性上都显着好于细胞涂片HE染色。这首要是因为细胞块散布比较均匀，能够充沛坚持掉落细胞的实践形状结构，使得在进行区分查看时能够明晰地区分细胞的形状。而细胞涂片则因为散布不均匀，因而简略导致细胞堆叠，然后致使细胞的结构不清楚，细胞形状不明晰，十分不利于胸腔积液的病理区分查看。尤其是细胞涂片易呈现厚薄不匀、数量差异致使简略呈现高布景上色，使得临床假阳性检出率增高，导致临床呈现误诊。并且细胞涂片因为其阳性表达细胞没有相应的对应规范，因而还添加临床判读的难度。但是，细胞块切片免疫组化染色却具有细胞涂片所不能具有的长处，比方细胞散布十分均匀、能够有用防止假阳性、其阳性表达易于调查、能够进行对应性的精确判读、标本能够永久性坚持、有利于回忆性研讨等等。这也是本文细胞块切片免疫组化染色检测分型确诊恶性胸腔积液的契合率高达96.67%的重要原因。
可见，运用细胞块切片免疫组化染色能够有用防止细胞涂片HE染色带来的高误诊率和高漏诊率。从临床使用经历剖析，细胞块切片免疫组化染色对判别浆膜腔积液的细胞类型和性质是十分有利的。因而，从现在的技能水平来讲，细胞块切片免疫组化染色是对胸腔积液进行病理确诊的最优办法。但是，最为重要也最为要害的是，细胞块切片的拟定进程十分简略，操作简略易行，标本易于保存，关于我国医疗水平比较低的广阔底层医院来说最为有用。endprint
在进行胸腔积液的细胞块切片免疫组化染色检测的进程中，检测的灵敏度和特异度对临床区分确诊抗体组合的挑选的依靠也是比较大的。一般来讲，肺腺癌有CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA表达，而间皮病变则首要有Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin表达。有临床研讨标明，CK7是临床肺腺癌的最灵敏的因子。因为这种组合的挑选对临床进行肺腺癌和间皮瘤的筛查十分重要，因而一般都将上述因子作为一线抗体进行临床使用，当然还需要结合临床病史、随访材料等进行归纳区分。
总而言之，在恰当的抗体组合下，胸腔积液细胞块切片结合免疫组化染色检测对比如肺腺癌和间皮瘤等恶性胸腔积液具有十分的病理区分确诊作用，值得临床予以推行。
[参考文献]
[1] 斯向东，李庆. 细胞块切片及免疫组化在恶性浆膜腔积液确诊中的使用领会[J]. 我国现代医师，2011，49（28）：114-115.
[2] 石园，胡沁，周杨，等. 细胞块技能在淋巴造血安排肿瘤确诊及区分确诊中的含义[J]. 中华病理学杂志，2010，39（8）：553-554.
[3] 尚士宣，赵晓丹，肖月英. 细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学确诊中的使用[J]. 肿瘤根底与临床，2010，23（6）：514-515.
[4] 侯刚，尹燕，韩丹. 胸腔积液掉落细胞免疫组化染色对肿瘤来历区分确诊价值的评论[J]. 中华肿瘤防治杂志，2012，19（21）：1647-1650.
[5] 毛瑛玉，杨敏，刘冬戈，等. 细胞块切片免疫细胞化学染色在浆膜腔积液细胞学确诊中的使用[J]. 中华病理学杂志，2009，38（8）：547-550.
[6] 梁宜骞，于洪波，郭颖，等. 肺癌特异性小分子肽在胸腔积液掉落细胞确诊中的使用[J]. 中华肿瘤防治杂志，2010，17（9）：687-689.
[7] 宋小运，许绍发，刘志东，等. 恶性胸膜间皮瘤术后预后要素剖析[J]. 中华肿瘤防治杂志，2010，17（18）：1467-1469.
[8] 曹跃华，杨敏，陈隆文，等. 细胞病理学确诊图谱及试验技能[M]. 北京：北京科学技能出版社，2009：410-412.
[9] 谢深科，舒千玉，姚军. 细胞块免疫符号在胸腹水细胞病理确诊与区分确诊中的价值[J]. 我国医疗前沿，2011，6（4）：73-74.
[10] 唐应成，梁利斌，杨瑞仙，等. 胸腔积液细胞块免疫组化染色的病理确诊价值[J]. 第三军医大学学报，2012， 34（15）：1568-1571.
（收稿日期：2013-10-18）endprint
在进行胸腔积液的细胞块切片免疫组化染色检测的进程中，检测的灵敏度和特异度对临床区分确诊抗体组合的挑选的依靠也是比较大的。一般来讲，肺腺癌有CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA表达，而间皮病变则首要有Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin表达。有临床研讨标明，CK7是临床肺腺癌的最灵敏的因子。因为这种组合的挑选对临床进行肺腺癌和间皮瘤的筛查十分重要，因而一般都将上述因子作为一线抗体进行临床使用，当然还需要结合临床病史、随访材料等进行归纳区分。
总而言之，在恰当的抗体组合下，胸腔积液细胞块切片结合免疫组化染色检测对比如肺腺癌和间皮瘤等恶性胸腔积液具有十分的病理区分确诊作用，值得临床予以推行。
[参考文献]
[1] 斯向东，李庆. 细胞块切片及免疫组化在恶性浆膜腔积液确诊中的使用领会[J]. 我国现代医师，2011，49（28）：114-115.
[2] 石园，胡沁，周杨，等. 细胞块技能在淋巴造血安排肿瘤确诊及区分确诊中的含义[J]. 中华病理学杂志，2010，39（8）：553-554.
[3] 尚士宣，赵晓丹，肖月英. 细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学确诊中的使用[J]. 肿瘤根底与临床，2010，23（6）：514-515.
[4] 侯刚，尹燕，韩丹. 胸腔积液掉落细胞免疫组化染色对肿瘤来历区分确诊价值的评论[J]. 中华肿瘤防治杂志，2012，19（21）：1647-1650.
[5] 毛瑛玉，杨敏，刘冬戈，等. 细胞块切片免疫细胞化学染色在浆膜腔积液细胞学确诊中的使用[J]. 中华病理学杂志，2009，38（8）：547-550.
[6] 梁宜骞，于洪波，郭颖，等. 肺癌特异性小分子肽在胸腔积液掉落细胞确诊中的使用[J]. 中华肿瘤防治杂志，2010，17（9）：687-689.
[7] 宋小运，许绍发，刘志东，等. 恶性胸膜间皮瘤术后预后要素剖析[J]. 中华肿瘤防治杂志，2010，17（18）：1467-1469.
[8] 曹跃华，杨敏，陈隆文，等. 细胞病理学确诊图谱及试验技能[M]. 北京：北京科学技能出版社，2009：410-412.
[9] 谢深科，舒千玉，姚军. 细胞块免疫符号在胸腹水细胞病理确诊与区分确诊中的价值[J]. 我国医疗前沿，2011，6（4）：73-74.
[10] 唐应成，梁利斌，杨瑞仙，等. 胸腔积液细胞块免疫组化染色的病理确诊价值[J]. 第三军医大学学报，2012， 34（15）：1568-1571.
（收稿日期：2013-10-18）endprint
在进行胸腔积液的细胞块切片免疫组化染色检测的进程中，检测的灵敏度和特异度对临床区分确诊抗体组合的挑选的依靠也是比较大的。一般来讲，肺腺癌有CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA表达，而间皮病变则首要有Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin表达。有临床研讨标明，CK7是临床肺腺癌的最灵敏的因子。因为这种组合的挑选对临床进行肺腺癌和间皮瘤的筛查十分重要，因而一般都将上述因子作为一线抗体进行临床使用，当然还需要结合临床病史、随访材料等进行归纳区分。
总而言之，在恰当的抗体组合下，胸腔积液细胞块切片结合免疫组化染色检测对比如肺腺癌和间皮瘤等恶性胸腔积液具有十分的病理区分确诊作用，值得临床予以推行。
[参考文献]
[1] 斯向东，李庆. 细胞块切片及免疫组化在恶性浆膜腔积液确诊中的使用领会[J]. 我国现代医师，2011，49（28）：114-115.
[2] 石园，胡沁，周杨，等. 细胞块技能在淋巴造血安排肿瘤确诊及区分确诊中的含义[J]. 中华病理学杂志，2010，39（8）：553-554.
[3] 尚士宣，赵晓丹，肖月英. 细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学确诊中的使用[J]. 肿瘤根底与临床，2010，23（6）：514-515.
[4] 侯刚，尹燕，韩丹. 胸腔积液掉落细胞免疫组化染色对肿瘤来历区分确诊价值的评论[J]. 中华肿瘤防治杂志，2012，19（21）：1647-1650.
[5] 毛瑛玉，杨敏，刘冬戈，等. 细胞块切片免疫细胞化学染色在浆膜腔积液细胞学确诊中的使用[J]. 中华病理学杂志，2009，38（8）：547-550.
[6] 梁宜骞，于洪波，郭颖，等. 肺癌特异性小分子肽在胸腔积液掉落细胞确诊中的使用[J]. 中华肿瘤防治杂志，2010，17（9）：687-689.
[7] 宋小运，许绍发，刘志东，等. 恶性胸膜间皮瘤术后预后要素剖析[J]. 中华肿瘤防治杂志，2010，17（18）：1467-1469.
[8] 曹跃华，杨敏，陈隆文，等. 细胞病理学确诊图谱及试验技能[M]. 北京：北京科学技能出版社，2009：410-412.
[9] 谢深科，舒千玉，姚军. 细胞块免疫符号在胸腹水细胞病理确诊与区分确诊中的价值[J]. 我国医疗前沿，2011，6（4）：73-74.
[10] 唐应成，梁利斌，杨瑞仙，等. 胸腔积液细胞块免疫组化染色的病理确诊价值[J]. 第三军医大学学报，2012， 34（15）：1568-1571.
（收稿日期：2013-10-18）endprint
