段海波++++++庞丹梅++++++曹硕
[摘要] 意图 了解晚期乳腺癌患者化疗中Th1/Th2细胞因子的改动趋势，评论Th1/Th2的改动与化疗近期效果的联系。 办法 运用流式微阵列术检测乳腺癌患者化疗前1周内、榜首阶段第20天、第二阶段第20天、第四阶段第20天Th1（IL-2、TNF、IFN-γ）/Th2（IL-4、IL-6、IL-10）细胞因子的浓度，一起选用RECIST规范点评化疗近期效果。 成果 126例乳腺癌患者化疗有用率为59.52%。化疗有用患者中血清Th1类细胞因子浓度逐步升高，其间IL-2、TNF的增高程度有统计学含义（P=0.005和0.001）。Th2类细胞因子在化疗过程中均逐步下降，其间IL-4、IL-6的下降程度有统计学含义（P=0.01和0.001）。化疗无效病例中，血清Th1类细胞因子未见上升趋势。而Th2类细胞因子则跟着化疗的进行均呈现升高趋势，其间IL-4、IL-6升高的程度有统计学含义（P=0.001和0.005）。 定论 晚期乳腺癌患者存在Th1/Th2失衡，无效化疗会促进Th1/Th2失衡，而有用化疗可反转Th1/Th2失衡。
[关键词] 晚期乳腺癌；Th1/Th2细胞因子；化疗
[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2014）09-0022-03
近年来辅助性T淋巴细胞1（helper T lymphocyte 1，Th1）/辅助性T淋巴细胞2（helper T lymphocyte 2，Th2）细胞份额改动与肿瘤免疫的联系已越来越遭到人们的注重。已知Th1类细胞因子包含IL-2、TNF、IFN-γ等，首要参加细胞免疫；Th2类细胞因子包含IL-4、IL-6、IL-10等，首要与体液免疫有关。细胞免疫是抗肿瘤免疫的首要机制，体液免疫仅在某些状况下起协同效果。Th1/Th2彼此调理，彼此限制，处于一种动态平衡。假如Th1和Th2极化发作偏移，简单诱发病理改动[1]。本研讨使用流式细胞仪检测乳腺癌患者化疗前及化疗中血清Th1/Th2细胞因子的水平，了解化疗中Th1/Th2的改动趋势，评论Th1/Th2的改动与化疗近期效果的联系。
1 材料与办法
1.1 临床材料
2010年1月～2013年6月我院初诊复发搬运性乳腺癌病例共157例，一切病例均经安排病理学查看后确诊。其间126例患者承受了2个阶段以上的化疗。126例患者的中位年纪55（39～78）岁，年纪≥60岁的占40.2%。骨搬运56例（44.44%），肺搬运33例（26.19%），肝搬运28例（22.22%），多发搬运34例（26.98%）。在医治前1周内，榜首阶段第20天、第二阶段第20天、第四阶段第20天采全血2 mL检测Th1（IL-2、TNF、IFN-γ）/Th2（IL-4、IL-6、IL-10）细胞因子的浓度。
1.2 检测办法
1.2.1 首要试剂和仪器 试剂为人细胞因子（IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ）重组蛋白冻干粉（BD公司）。实验仪器为FACS Calibur型流式细胞仪（BD公司）。
1.2.2 检测过程 首先按操作规程制造Th1/Th2细胞因子规范品和捕获微球，之后将这些试剂和待测样品参加相应的试管预备孵育和检测。为了校准流式细胞仪和定量待测样品，每次实验都要求一起设置规范组和质控组。①参加50 μL接连稀释的规范液到各规范管；②参加50 μL各种待测样品到相应待测管；③室温下避光孵育3 h；④每管加1 mL洗刷缓冲液并离心，200×g，5 min；⑤当心吸出各检测管中的上清，弃去；⑥每管加300 μL洗刷液，重悬微球沉淀物；⑦振动试管，当即上流式细胞仪检测、剖析。
1.3 化疗计划及点评办法
一切患者均为一线化疗，卡培他滨（1.0 g/m2，bid，d1～14）+多西他赛（75 mg/m2，d1）计划化疗47例（37.30%），吉西他滨（1000 mg/m2，d1、d8）+紫杉醇（175 mg/m2，d1）计划化疗34例（26.98%），单药多西他赛（75 mg/m2，d1）计划化疗20例（15.87%），紫杉醇（175 mg/m2，d1）+卡铂（AUC=6，d1）计划化疗25例（19.84%）。效果参照RECIST实体瘤效果规范进行点评，分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、安稳（SD）、发展（PD），有用率（RR）=CR+PR，每两周期点评一次效果。
1.4 统计学办法
使用SPSS17.0软件包进行统计学剖析，Th1/Th2细胞因子浓度用均数±规范差（x±s）标明。细胞因子化疗前后的比较选用重测数据的方差剖析，P < 0.05为差异有统计学含义。
2 成果
126例患者共承受542个阶段化疗，中位医治4个阶段。化疗全体有用率为59.52%，其间CR 5例，占3.97%；PR 70例，占55.56%；SD 35例，占27.78%；PD 16例，占12.70%。
在75例化疗有用的病例中，血清Th1类细胞因子IL-2、TNF和IFN-γ浓度在化疗过程中均逐步升高，其间IL-2、TNF的增高程度有统计学含义（P=0.005和0.001）。与之相反的是，血清Th2类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10在化疗过程中均逐步下降，其间IL-4、IL-6的下降程度有统计学含义（P=0.01和0.001）。见表1。
在51例化疗无效病例中，血清Th1类细胞因子IL-2、TNF、IFN-γ跟着化疗的进行均未见上升趋势，P值分别为0.80、0.81和0.86。而Th2类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10则跟着化疗的进行均呈现升高趋势，其间IL-4、IL-6升高的程度到达统计学含义（P=0.001和0.005）。见表2。
3 评论
现已知，辅助性T细胞（helper T lymphocyte，Th）依据其功用不同分为Th1和Th2两个亚群。Th1首要经过排泄IL-2、TNF、IFN-γ、LT来介导细胞免疫和炎症反响，抗病毒、肿瘤和细胞内寄生菌感染，参加按捺物排挤；Th2首要经过排泄IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13来促进B细胞增殖，发生抗体和超敏反响。肿瘤发作后，细胞免疫是抗肿瘤的首要方法，而体液免疫一般仅在某些状况下起协同效果[2]。研讨标明以IL-2、IFN-γ介导的Th1为主的细胞免疫在铲除肿瘤及取得记忆性细胞免疫中发挥重要效果[3]。一旦Th1/Th2细胞失衡，Th2细胞及其排泄的细胞因子IL-4、IL-10等占优势，则提示机体抗肿瘤反响受按捺，机体的抗肿瘤免疫将遭到严峻搅扰[4]。
晚期肿瘤患者免疫功用处于按捺状况，调理性T细胞增多、效应T细胞削减、抗原提呈细胞功用低下。化疗药物易致淋巴细胞削减，且经过诱导凋亡杀死靶细胞，而凋亡的肿瘤细胞曾被以为不能有用激活免疫细胞，甚至能诱发免疫耐受，因而化疗之后机体的免疫功用低下。Beyer等研讨[5]发现缓慢淋巴细胞性白血病患者予以氟达拉滨医治后，其体内Treg细胞数量显着削减；吉西他滨与奥沙利铂等联合医治搬运性结肠癌患者Tr细胞也显着削减[6]。因而咱们以为，化疗可能使肿瘤安排内的APCs负载更多的肿瘤抗原，并给肿瘤内的CD8+T细胞供给协同影响信号。有用的化疗可以导致肿瘤的减灭，然后改动效应T细胞与靶细胞的份额。一些化疗药，如多柔比星和甲氨蝶呤均具有上调Fas配体的转录效果[7]；还有些化疗药经过改动凋亡途径，导致不只不会损坏机体免疫功用，反而有可能对免疫系统起到增益效果。
本研讨75例乳腺癌患者化疗后有用的病例Th1类细胞因子IL-2、TNF、IFN-γ的浓度呈现不同程度的升高，其间IL-2、TNF升高较化疗前比较差异有统计学含义（P < 0.05）；Th2类细胞因子的浓度呈现显着下降，其间IL-4、IL-6下降程度较化疗前差异有统计学含义（P < 0.05），以上提示化疗有用病例患者的Th1类细胞因子全体升高、Th2类细胞因子全体下降的趋势。这种改动趋势使得医治前失衡的Th1/Th2份额联系得到纠正。而51例化疗无效病例的Th1/Th2改动趋势与上述比较正相反，此种现象与马学真等[8]的研讨根本共同，阐明无效化疗对肿瘤负荷无改动，使得本已失衡的Th1/Th2份额联系进一步向Th2偏移；有用化疗后，下降了肿瘤负荷，削减了肿瘤源性的免疫按捺，促进Th2向Th1偏移，然后提高了患者的细胞免疫功用。
研讨证明，晚期乳腺癌患者化疗前后细胞因子Th1/Th2发作了漂移，能否依据化疗前后Th1/Th2细胞因子改动特色，进行针对性的免疫医治，以修正Th1/Th2类细胞因子的免疫失衡，这也是咱们需求进一步研讨的课题。
[参考文献]
[1] Wan YY. Multi-tasking of helper T cells[J]. Immunology，2010，130（2）：166-171.
[2] Knutson KL，Disis ML. Tumor antigen specific T helper cells in cancer immunity and immunotherapy[J]. Cancer Immunol Immunother，2005，54（8）：721-728.
[3] Satyam A，Singh P，Badjatia N，et al. A disproportion of Th1/Th2 cytokines with predominance of TH2，in urothelial carcinoma of bladder[J]. Urol Oncol，2011，29（1）：58-65.
[4] Agarwal A，Agrawal U，Verma S，et al. Serum Th1 and Th2 cytokine balance in patients of superficial transitional cell carcinoma of bladder pre- and post-intravesical combination immunotherapy[J]. Immunopharmacol Immunotoxicol，2010，32（2）：348-356.
[5] Ziegler SF，Buckner JH. FOXP3 and the regulation of Treg/Th17 differentiation[J]. Microbes Infect，2009，11（5）：594-598.
[6] Chapoval S，Dasgupta P，Dorsey NJ，et al. Regulation of the T helper cell type 2 （Th2）/T regulatory cell （Treg） balance by IL-4 and STAT6[J]. J Leukoc Biol，2010，87（6）：1011-1018.
[7] Yang S，Haluska FG. Treatment of melanoma with 5-fluorouracil or dacarbazine in vitro sensitizes cells to antigen-specific CTL lysis through perforin/granzyme- and Fas-mediated pathways[J]. J Immunol，2004，172（7）：4599-4608.
[8] 马学真，姚远，王斌. 晚期肺癌患者胸水及外周血Th1、Th2细胞功用的剖析及含义[J]. 我国肿瘤生物医治杂志，2004，11（3）：212-214.
（收稿日期：2014-01-07）
3 评论
现已知，辅助性T细胞（helper T lymphocyte，Th）依据其功用不同分为Th1和Th2两个亚群。Th1首要经过排泄IL-2、TNF、IFN-γ、LT来介导细胞免疫和炎症反响，抗病毒、肿瘤和细胞内寄生菌感染，参加按捺物排挤；Th2首要经过排泄IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13来促进B细胞增殖，发生抗体和超敏反响。肿瘤发作后，细胞免疫是抗肿瘤的首要方法，而体液免疫一般仅在某些状况下起协同效果[2]。研讨标明以IL-2、IFN-γ介导的Th1为主的细胞免疫在铲除肿瘤及取得记忆性细胞免疫中发挥重要效果[3]。一旦Th1/Th2细胞失衡，Th2细胞及其排泄的细胞因子IL-4、IL-10等占优势，则提示机体抗肿瘤反响受按捺，机体的抗肿瘤免疫将遭到严峻搅扰[4]。
晚期肿瘤患者免疫功用处于按捺状况，调理性T细胞增多、效应T细胞削减、抗原提呈细胞功用低下。化疗药物易致淋巴细胞削减，且经过诱导凋亡杀死靶细胞，而凋亡的肿瘤细胞曾被以为不能有用激活免疫细胞，甚至能诱发免疫耐受，因而化疗之后机体的免疫功用低下。Beyer等研讨[5]发现缓慢淋巴细胞性白血病患者予以氟达拉滨医治后，其体内Treg细胞数量显着削减；吉西他滨与奥沙利铂等联合医治搬运性结肠癌患者Tr细胞也显着削减[6]。因而咱们以为，化疗可能使肿瘤安排内的APCs负载更多的肿瘤抗原，并给肿瘤内的CD8+T细胞供给协同影响信号。有用的化疗可以导致肿瘤的减灭，然后改动效应T细胞与靶细胞的份额。一些化疗药，如多柔比星和甲氨蝶呤均具有上调Fas配体的转录效果[7]；还有些化疗药经过改动凋亡途径，导致不只不会损坏机体免疫功用，反而有可能对免疫系统起到增益效果。
本研讨75例乳腺癌患者化疗后有用的病例Th1类细胞因子IL-2、TNF、IFN-γ的浓度呈现不同程度的升高，其间IL-2、TNF升高较化疗前比较差异有统计学含义（P < 0.05）；Th2类细胞因子的浓度呈现显着下降，其间IL-4、IL-6下降程度较化疗前差异有统计学含义（P < 0.05），以上提示化疗有用病例患者的Th1类细胞因子全体升高、Th2类细胞因子全体下降的趋势。这种改动趋势使得医治前失衡的Th1/Th2份额联系得到纠正。而51例化疗无效病例的Th1/Th2改动趋势与上述比较正相反，此种现象与马学真等[8]的研讨根本共同，阐明无效化疗对肿瘤负荷无改动，使得本已失衡的Th1/Th2份额联系进一步向Th2偏移；有用化疗后，下降了肿瘤负荷，削减了肿瘤源性的免疫按捺，促进Th2向Th1偏移，然后提高了患者的细胞免疫功用。
研讨证明，晚期乳腺癌患者化疗前后细胞因子Th1/Th2发作了漂移，能否依据化疗前后Th1/Th2细胞因子改动特色，进行针对性的免疫医治，以修正Th1/Th2类细胞因子的免疫失衡，这也是咱们需求进一步研讨的课题。
[参考文献]
[1] Wan YY. Multi-tasking of helper T cells[J]. Immunology，2010，130（2）：166-171.
[2] Knutson KL，Disis ML. Tumor antigen specific T helper cells in cancer immunity and immunotherapy[J]. Cancer Immunol Immunother，2005，54（8）：721-728.
[3] Satyam A，Singh P，Badjatia N，et al. A disproportion of Th1/Th2 cytokines with predominance of TH2，in urothelial carcinoma of bladder[J]. Urol Oncol，2011，29（1）：58-65.
[4] Agarwal A，Agrawal U，Verma S，et al. Serum Th1 and Th2 cytokine balance in patients of superficial transitional cell carcinoma of bladder pre- and post-intravesical combination immunotherapy[J]. Immunopharmacol Immunotoxicol，2010，32（2）：348-356.
[5] Ziegler SF，Buckner JH. FOXP3 and the regulation of Treg/Th17 differentiation[J]. Microbes Infect，2009，11（5）：594-598.
[6] Chapoval S，Dasgupta P，Dorsey NJ，et al. Regulation of the T helper cell type 2 （Th2）/T regulatory cell （Treg） balance by IL-4 and STAT6[J]. J Leukoc Biol，2010，87（6）：1011-1018.
[7] Yang S，Haluska FG. Treatment of melanoma with 5-fluorouracil or dacarbazine in vitro sensitizes cells to antigen-specific CTL lysis through perforin/granzyme- and Fas-mediated pathways[J]. J Immunol，2004，172（7）：4599-4608.
[8] 马学真，姚远，王斌. 晚期肺癌患者胸水及外周血Th1、Th2细胞功用的剖析及含义[J]. 我国肿瘤生物医治杂志，2004，11（3）：212-214.
（收稿日期：2014-01-07）
3 评论
现已知，辅助性T细胞（helper T lymphocyte，Th）依据其功用不同分为Th1和Th2两个亚群。Th1首要经过排泄IL-2、TNF、IFN-γ、LT来介导细胞免疫和炎症反响，抗病毒、肿瘤和细胞内寄生菌感染，参加按捺物排挤；Th2首要经过排泄IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13来促进B细胞增殖，发生抗体和超敏反响。肿瘤发作后，细胞免疫是抗肿瘤的首要方法，而体液免疫一般仅在某些状况下起协同效果[2]。研讨标明以IL-2、IFN-γ介导的Th1为主的细胞免疫在铲除肿瘤及取得记忆性细胞免疫中发挥重要效果[3]。一旦Th1/Th2细胞失衡，Th2细胞及其排泄的细胞因子IL-4、IL-10等占优势，则提示机体抗肿瘤反响受按捺，机体的抗肿瘤免疫将遭到严峻搅扰[4]。
晚期肿瘤患者免疫功用处于按捺状况，调理性T细胞增多、效应T细胞削减、抗原提呈细胞功用低下。化疗药物易致淋巴细胞削减，且经过诱导凋亡杀死靶细胞，而凋亡的肿瘤细胞曾被以为不能有用激活免疫细胞，甚至能诱发免疫耐受，因而化疗之后机体的免疫功用低下。Beyer等研讨[5]发现缓慢淋巴细胞性白血病患者予以氟达拉滨医治后，其体内Treg细胞数量显着削减；吉西他滨与奥沙利铂等联合医治搬运性结肠癌患者Tr细胞也显着削减[6]。因而咱们以为，化疗可能使肿瘤安排内的APCs负载更多的肿瘤抗原，并给肿瘤内的CD8+T细胞供给协同影响信号。有用的化疗可以导致肿瘤的减灭，然后改动效应T细胞与靶细胞的份额。一些化疗药，如多柔比星和甲氨蝶呤均具有上调Fas配体的转录效果[7]；还有些化疗药经过改动凋亡途径，导致不只不会损坏机体免疫功用，反而有可能对免疫系统起到增益效果。
本研讨75例乳腺癌患者化疗后有用的病例Th1类细胞因子IL-2、TNF、IFN-γ的浓度呈现不同程度的升高，其间IL-2、TNF升高较化疗前比较差异有统计学含义（P < 0.05）；Th2类细胞因子的浓度呈现显着下降，其间IL-4、IL-6下降程度较化疗前差异有统计学含义（P < 0.05），以上提示化疗有用病例患者的Th1类细胞因子全体升高、Th2类细胞因子全体下降的趋势。这种改动趋势使得医治前失衡的Th1/Th2份额联系得到纠正。而51例化疗无效病例的Th1/Th2改动趋势与上述比较正相反，此种现象与马学真等[8]的研讨根本共同，阐明无效化疗对肿瘤负荷无改动，使得本已失衡的Th1/Th2份额联系进一步向Th2偏移；有用化疗后，下降了肿瘤负荷，削减了肿瘤源性的免疫按捺，促进Th2向Th1偏移，然后提高了患者的细胞免疫功用。
研讨证明，晚期乳腺癌患者化疗前后细胞因子Th1/Th2发作了漂移，能否依据化疗前后Th1/Th2细胞因子改动特色，进行针对性的免疫医治，以修正Th1/Th2类细胞因子的免疫失衡，这也是咱们需求进一步研讨的课题。
[参考文献]
[1] Wan YY. Multi-tasking of helper T cells[J]. Immunology，2010，130（2）：166-171.
[2] Knutson KL，Disis ML. Tumor antigen specific T helper cells in cancer immunity and immunotherapy[J]. Cancer Immunol Immunother，2005，54（8）：721-728.
[3] Satyam A，Singh P，Badjatia N，et al. A disproportion of Th1/Th2 cytokines with predominance of TH2，in urothelial carcinoma of bladder[J]. Urol Oncol，2011，29（1）：58-65.
[4] Agarwal A，Agrawal U，Verma S，et al. Serum Th1 and Th2 cytokine balance in patients of superficial transitional cell carcinoma of bladder pre- and post-intravesical combination immunotherapy[J]. Immunopharmacol Immunotoxicol，2010，32（2）：348-356.
[5] Ziegler SF，Buckner JH. FOXP3 and the regulation of Treg/Th17 differentiation[J]. Microbes Infect，2009，11（5）：594-598.
[6] Chapoval S，Dasgupta P，Dorsey NJ，et al. Regulation of the T helper cell type 2 （Th2）/T regulatory cell （Treg） balance by IL-4 and STAT6[J]. J Leukoc Biol，2010，87（6）：1011-1018.
[7] Yang S，Haluska FG. Treatment of melanoma with 5-fluorouracil or dacarbazine in vitro sensitizes cells to antigen-specific CTL lysis through perforin/granzyme- and Fas-mediated pathways[J]. J Immunol，2004，172（7）：4599-4608.
[8] 马学真，姚远，王斌. 晚期肺癌患者胸水及外周血Th1、Th2细胞功用的剖析及含义[J]. 我国肿瘤生物医治杂志，2004，11（3）：212-214.
（收稿日期：2014-01-07）
