陈璐 张鑫淼 李更晓
[摘要] 意图 构建大鼠糖尿病肾病模型，比照氯沙坦联合前列腺素E1与ACEI类药物对模型大鼠的药效学差异。办法 大鼠静脉打针链脲佐菌素联合食物诱导糖尿病肾病大鼠模型，按其给药办法分为空白组、模型对照组、卡托普利组、氯沙坦组、前列腺素E1组、氯沙坦联合前列腺素E1组，造模成功后接连用药4周，调查其血糖（Glu）、糖化血红蛋白（HbA1c）、血胰岛素（FINS）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、血胆固醇（CH）、血甘油三酯（TG）、尿量（Vol）、尿肌酐（Cr）、尿蛋白（Pro）、肾指数（RI）、肾小球直径和面积。 成果 与空白组比较，模型对照组Glu、HbA1c、BUN、Scr、CH、TG、Vol、Pro、FINS、RI显着上升（P<0.01），Cr显着下降（P<0.01）。各给药组较模型对照组Glu、FINS、HbA1c、BUN、Scr、CH、TG、Vol、Pro、RI下降，Cr升高，肾小球直径、面积、肾指数显着改进（P<0.05）。 定论 氯沙坦与前列腺E1联合运用较独自运用ACEI类药物药效更杰出，对糖尿病肾病的临床医治有重要的指导效果。
[关键词] 糖尿病肾病；联合用药；氯沙坦；前列腺素E1
[中图分类号] R587.2；R692 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）12-0035-04
Comparison of pharmacodynamic differences between losartan combined with prostaglandin E1 and ACEI drugs in diabetic nephropathy rats
CHEN Lu ZHANG Xinmiao LI Gengxiao YU Hang WANG Kuo TONG Lei
Mudanjiang Medical College， Mudanjiang 157011， China
[Abstract] Objective To establish a rat model of diabetic nephropathy and compare the pharmacodynamic differences between ACEIs and losartan combined with prostaglandin E1 in model rats. Methods Rats with diabetic nephropathy were induced by intravenous injection of streptozotocin combined with food and were divided into blank group， model group， captopril group， losartan group， prostaglandin E1 group and combination group according to their administration methods. After the model was successfully administered for 4 weeks， blood glucose（Glu）， HbA1c， FINS， BUN， Scr， blood cholesterol， blood triglyceride（TG）， urine volume（Vol）， urine creatinine（Cr）， urine protein（Pro）， kidney index（RI）， glomerular diameter and area were observed. Results Compared with those of the blank group， the Glu， HbA1c， BUN， Scr， CH， TG， Vol， Pro， FINS and RI in the model group increased significantly（P<0.01）， and Cr decreased significantly（P<0.01）. Compared with those of the model group， the Glu， FINS， HbA1c， BUN， Scr， CH， TG， Vol， Pro and RI decreased， and Cr increased in the administration groups， and glomerular diameter， area， and kidney index in the administration groups improved significantly（P<0.05）. Conclusion The combination of losartan and prostate E1 is more effective than ACEI alone， and the former play an important guidance role in the clinical treatment of diabetic nephropathy.
[Key words] Diabetic nephropathy； Combination medication； Losartan； Prostaglandin E1
糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病导致微血管病变的典型体现之一，不良饮食习惯、操控血糖不良、血压血脂反常升高级要素会加重肾脏危害，直至肾衰竭[1]。在现阶段临床上首要运用ACEI类药物医治该疾病，在1981年卡托普利的运用得到同意后，药物发展迅速，在医治DN上获得显着的效果[2]。本试验选取典型代表药卡托普利进行试验，该药物能够改进微血管血流，扩张肾血管，到达医治意图，已被广泛运用，但临床证明该类药物具有刺激性干咳的副效果，大都患者都无法接受。氯沙坦为AT1受体拮抗剂的代表药，与ACEI比较具有效果专注的特色。PGE1是人体内存在的一种生物活性物质，具有能够散布在受损血管的特性，改动其血液流变学，能够扩张血管，而且对血小板的集合起到按捺。本试验运用药理学试验办法，调查联合用药与独自用药的药效差异，并提醒其对糖尿病肾病肾脏功用的改进效果。现报导如下。
1 材料与办法
1.1 试验动物及试剂
健康SD大鼠72只，男女参半，体型匀称，雄性大鼠体重约（350±50）g，雌性大鼠体重约（230±40）g，约10周龄，购于长沙市天勤生物技能有限公司。养殖条件：由牡丹江医学院动物试验研讨中心养殖，许可证编号为scxk（湘）2014-0010，试验计划经本单位试验动物道德委员会同意，试验动物养殖及實验操作契合试验动物道德学要求。试验颗粒鼠饲料由江苏省协同医药生物工程有限责任公司供给，苏饲证（2014）01008。高脂高糖饲料[3]选自北京博泰宏达生物技能有限公司；尿蛋白定量试剂盒由上海晶抗生物工程有限公司供给，批号JKSJ-1820；肌酐试剂盒由北京博迈斯科技有限公司供给，批号K625-100；葡萄糖液体试剂盒由北京普利莱基因技能有限公司供给，批号E1010；胆固醇试剂盒由上海市协和梅迪克斯医疗器械有限公司供给，批号58236；胰岛素试剂盒由上海晨易生物科技有限公司供给。
1.2 试验药物
卡托普利片（卡托普利）由浙江南洋药业有限公司供给；科素亚（氯沙坦）由美国默沙东制药厂供给；前列地尔（前列腺素）由杭州志聚生物技能有限公司供给，链脲佐菌素（STZ）Sigma S-1290。
1.3 试验设备
全自动生化仪选用广州东唐电子科技有限公司DOTOP型；紫外分光光度计选用上海元析有限公司UV759S型；离心机选用北京年代北利离心机有限公司DT5-2型。
1.4 动物分组及病理模型的树立
健康SD大鼠72只随机分为6组，每组12只，分别为空白组、模型对照组、卡托普利组、氯沙坦组、前列腺素E1组、氯沙坦联合前列腺素E1组。空白组选用正常颗粒饲料，动物饮用纯净水喂食，模型对照组以高脂高糖饲料配12%果糖水饲喂6周后，经尾静脉以60 mg/kg剂量打针STZ一次[4-7]，其他各给药组采纳相同办法诱导。经过检测大鼠血糖改动、肾功用改动与肾安排病理学改动验证糖尿病肾病模型是否构建成功，未成功者退出模型组。
1.5 试验动物的给药及目标检测
空白组打针10 mL/kg的0.9%的NaCl qd，卡托普利组给予10 mg/（kg·d）的卡托普利 qd，氯沙坦组给予80 mg/（kg·d）qd，前列腺素E1组给予20 μg的前列地尔 qd，氯沙坦联合前列腺素E1组给予氯沙坦80 mg/（kg·d）加前列地尔20 μg qd，上午9时给药，接连静脉打针4周，试验完毕前，搜集24 h尿液进行称量，用离心机2200 r/min，离心10 min，去沉积，在-20℃保存待测，之后称大鼠体分量。运用戊巴比妥钠对大鼠进行腹腔麻醉，取腹主动脉血[8]，离心取血清检测特征性生化目标。取左边肾脏测其质量，随后剥离被膜，用17%的福尔马林液固定，惯例制片后运用光镜丈量肾小球的直径和面积并核算肾脏指数RI（RI=左肾质量/大鼠体质量×100）。
1.6 计算学剖析
所得数据均录入SPSS19.0计算软件进行单要素方差剖析，组间比较选用LSD法，计量材料以均数±标准差（x±s）标明，P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
2.1 氯沙坦联合前列腺素E1对糖尿病肾病大鼠Glu、HbA1c、FINS影响
六组血糖之间比较差异具有计算学含义（F=4.380，P<0.01），六组糖化血红蛋白之间比较差异具有计算学含义（F=12.195，P<0.01），六组血胰岛素之间比较差异具有计算学含义（F=5.682，P<0.01）。
糖尿病肾病模型对照组Glu、HbA1c、FINS值与空白组比较显着升高（P<0.01），氯沙坦联合前列腺素E1组与模型对照组Glu、HbA1c、FINS值比较显着下降（P<0.05或P<0.01），卡托普利组、氯沙坦组、前列腺素E1组Glu、HbA1c、FINS与模型对照组比较亦均有下降，差异有计算学含义（P<0.05或P<0.01），但关于Glu、HbA1c、FINS的下降氯沙坦联合前列腺素E1组与卡托普利组比较更为显着，其差异有计算学含义（P<0.05），见表1。
2.2 氯沙坦联合前列腺素E1对糖尿病肾病大鼠肾功用的影响
六组之间血清尿素氮比较差异具有计算学含义（F=7.696，P<0.01），六组血清肌酐之间比较差异具有计算学含义（F=3.585，P<0.01），六组血清胆固醇之间比较差异具有计算学含义（F=14.850，P<0.01），六组甘油三酯之间比较差异具有计算学含义（F=15.516，P<0.01）。
糖尿病肾病模型对照组BUN、Scr、CH、TG与空白组比较显着升高（P<0.01），标明大鼠肾功用受损，各给药组血清中BUN含量相关于模型对照组下降，有计算学含义（P<0.01或P<0.05），各给药组血清中Scr、TG含量相关于模型对照组下降有计算学含义（P<0.01或P<0.05），而氯沙坦联合前列腺素E1组相关于卡托普利组关于Scr、CH的下降亦有计算学含义（P<0.05），除氯沙坦联合前列腺素E1组外其他各给药组血清中CH含量相关于模型对照组无计算学含义（P>0.05），提示经过联合给药相关于独自运用卡托普利关于下降血清中CH及Scr含量有显着效果。见表2。
2.3 氯沙坦联合前列腺素E1对糖尿病肾病大鼠肾脏滤过功用的影响
六组尿量之间比较差异具有计算学含义（F=20.826，P<0.01），六组尿肌酐之间比较差异具有计算学含义（F=11.428，P<0.01），六组尿蛋白之间比较差异具有计算学含义（F=5.461，P<0.01）。
糖尿病肾病模型对照组与空白组比较尿量（Vol）、尿蛋白（Pro）水平添加有计算学含义（P<0.01），尿肌酐（Cr）水平下降有计算学含义（P<0.01），标明肾滤过功用受损，肌酐铲除功用下降。各给药组与模型对照组比较尿量的削减及尿肌酐含量的升高有计算学含义（P<0.01或P<0.05），各给药组尿蛋白含量相关于模型对照组下降有计算学含义（P<0.01或P<0.05）；其间氯沙坦联合前列腺素E1组相关于卡托普利组关于尿肌酐含量的升高有计算学含义（P<0.01），而氯沙坦联合前列腺素E1组相关于卡托普利组关于尿蛋白含量的下降有计算学含义（P<0.01），提示经过联合用药关于DN大鼠肾滤过功用目标的改进较独自运用卡托普利效果显着，见表3。
2.4 氯沙坦联合前列腺素E1对糖尿病肾病大鼠肾脏安排形状的影响
六组肾指数之间比较差异具有计算学含义（F=11.593，P<0.05），六组肾小球面积之间比较差异具有计算学含义（F=13.192，P<0.05），六组肾小球直径之间比较差异具有计算学含义（F=8.439，P<0.05）。
糖尿病肾病模型对照组与空白组比较，肾小球直径、肾小球面积及肾指数均有增大（P<0.01），可见肾脏呈现改动，大都肾小球直径显着增大，并伴有基底膜增厚、系膜细胞增生等体现，各给药组与模型对照组比较，肾脏病变及目标均有必定改进，而氯沙坦联合前列腺素E1组较卡托普利组对肾脏形状各项目标改进效果较为显着（P<0.05）。见表4。
3 评论
在本研讨中，大鼠在试验前均经严厉挑选，为健康大鼠，防止血压血脂等搅扰要素对试验成果的影响。经造模后，对试验目标进行测定，成果显现尿素氮和血肌酐升高，尿蛋白滤过率显着升高，阐明大鼠糖尿病肾病模型的构建是成功的，该模型可用于比较ACEI类药物与氯沙坦联合前列腺素E1的药效差异[9-13]。
关于糖尿病肾病的患者运用ACEI药物是国内外都比较常用的办法之一，但经临床用药的实践证明，ACEI存在起效慢、血管神经水肿、刺激性干咳、高血钾等一系列不可防止的副效果[14]。
氯沙坦对肾脏疾病具有很好的医治效果，对血压有很好的下降效果，對蛋白尿的下降也具有显着的改进效果，前列地尔能够阻挠血管缩短，改进并添加其病变的肾血液流量，进而改进肾小球的微环境，改进肾小球的滤过率，下降尿中分泌的蛋白含量[15，16]。
在本试验中，经过试验数据的剖析和总结发现，氯沙坦与前列腺素E1二者联合运用对DN大鼠Glu、Scr、CH、Cr、Pro等多个目标改进效果优于独自运用卡托普利，此试验成果为氯沙坦联合前列腺素E1关于糖尿病肾病的临床医治供给了必定的试验根据。
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（收稿日期：2017-12-19）
