王钱东+吴淑娟+朱国文+潘建春
[摘要] 意图 评论低剂量漆黄素（Fisetin）联合阈下剂量胡椒碱的抗郁闷效果是否触及单胺机制。 办法 选用行为失望郁闷模型，即小鼠逼迫游水试验和悬尾试验，调查低剂量漆黄素与阈下剂量胡椒碱急性给药对小鼠失望模型不动时刻的影响，一起调查两药联用对小鼠自主活动的影响。高效液相-电化学检测脑区中单胺递质的含量，荧光分光光度法检测单胺氧化酶（MAO）活性。 成果 漆黄素（1.25 mg/kg， 2.5 mg/kg， 5 mg/kg， ig）与阈下剂量胡椒碱2.5 mg/kg·ip联合运用能显着削减小鼠逼迫游水和悬尾试验中的不动时刻，且试验剂量范围内药物不影响小鼠的自主活动。低剂量漆黄素与阈下剂量胡椒碱合用能升高海马、皮层和杏仁核中的单胺递质水平一起下降脑内的MAO活性，而且具有计算学含义。 定论 低剂量漆黄素与阈下剂量胡椒碱联合用药能改进郁闷症样行为，该机制可能是经过按捺单胺氧化酶的活性，然后添加相关的神经递质。
[关键词] 漆黄素；胡椒碱；郁闷症；单胺递质；单胺氧化酶（MAO）
[中图分类号] R964 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2014）25-0001-06
郁闷症会影响身心健康，是一个常见且严峻的精神妨碍。郁闷症患者现在约占国际人口的21%[1]，其主要症状是下降言语功用、运动缓慢等。现在，临床上运用的抗郁闷药物主要有三类：单胺氧化酶（MAO）按捺剂，经典的三环类抗郁闷药药物，选择性5-HT重吸取按捺剂5-羟色胺和去甲肾上腺素再吸取按捺剂[2，3]。由于这些药物只有约65%的患者有必定的效果，且有药效不稳定、毒副效果大、起效时刻长等缺陷。因而寻觅新式的高效低毒药物作为抗郁闷的医治十分的重要。
漆黄素（Fisetin，又叫非瑟酮）是一种多酚类化合物，其含量在草莓中最高[4]。有文献报导，漆黄素具有维护和促进神经细胞再生效果而且可以改进动物的学习回忆才能[5，6]。此外，C6胶质瘤细胞，漆黄素按捺单胺氧化酶（MAO）活性亚型，它可以调理细胞内的脑儿茶酚胺和5 - 羟色胺（5-HT）含量的效果。胡椒碱是胡椒的主要成分，具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调理等药理效果，现在已经有胡椒碱的研讨标明，其具有较强的抗郁闷活性，这可能与大脑酶单胺[7]（单胺氧化酶，MAO）的活性有关。文献报导，胡椒碱可以经过减慢白藜芦醇的代谢和延伸其在体内的时刻来增强多酚类化合物白藜芦醇的生物效应[8]。库尔卡尼和姜黄素和胡椒碱的其他主张结合能显着增强姜黄素[9，26]的抗郁闷效果。
本研讨首要提出了漆黄素和胡椒碱的联合运用，评论其联用的抗郁闷机制，一起阐明联用是否能下降漆黄素的用药剂量，来到达单用时的效果，然后进步漆黄素的生物利费用，为开发新一代的高效低毒天然抗郁闷药物供给一条新的思路。
1 材料与办法
1.1 药品与试剂
漆黄素和氟西汀均购自美国Sigma公司；吗氯贝胺购自我国药品生物制品检定所。漆黄素、吗氯贝胺和氟西汀均用蒸馏水溶解，漆黄素和吗氯贝胺均灌胃给药，氟西汀腹腔给药。联合用药的给药办法为：先灌胃给予漆黄素（1.25 mg/kg， 2.5 mg/kg 和5 mg/kg），45 min后再别离腹腔打针胡椒碱（2.5 mg/kg），15 min后进行测验；在预试验中，给予胡椒碱和蒸馏水的小鼠在悬尾和逼迫游水不动时刻上没有显着差异，所以在正式试验中仅用胡椒碱作为对照组。
1.2试验仪器
BS-11OS型电子剖析天平，北京赛多利斯天平有限公司；WH-966漩涡混合器，太仓市科教器材厂；DY89-Ⅱ型电动玻璃匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司；Bio-RAD 680酶标仪，美国伯乐公司；RF-5301PC型荧光分光光度计，日本岛津公司；JY92-2D超声波细胞粉碎机，宁波新芝生物科技股份有限公司。
1.3 试验动物
雄性ICR小鼠，体质量为20～25g，购自温州医科大学试验动物中心。小鼠随机分组，8只/笼，室温（25±1）℃，湿度（50±10）%，天然光照，自在摄食饮水条件下进行试验。开端试验之前先习惯5d。小鼠随机分组：正常对照组（Pip 2.5 mg/kg）、联合给药组（Pip 2.5 mg/kg+Fisetin 1.25 mg/kg， 2.5 mg/kg，5 mg/kg ）、氟西汀组（10 mg/kg）和吗氯贝胺组（20 mg/kg ）。吗氯贝胺组用于MAO活性的测定。
1.4 小鼠悬尾试验[10]
小鼠末次给药后，在小鼠的尾巴结尾用医用胶带固定，然后将此悬挂在小鼠悬尾测验仪器中（其悬挂高度为50 cm）。调查小鼠在6 min内的行为并记载最终4min内小鼠的不动时刻。小鼠的不动时刻规范：小鼠倒挂在仪器中体现为彻底不动。
1.5 小鼠逼迫游水试验[11]
在测验前24h，将小鼠放在一个装有水的圆形玻璃容器内，水的深度为10 cm，水的温度为24 ℃～25 ℃（圆形玻璃容器的规范：高25 cm；直径10 cm）进行逼迫游水练习，时刻为15 min。24 h今后再次给药，然后将小鼠再次放入玻璃圆缸内做逼迫游水6 min，调查并记载后4 min小鼠的逼迫游水的不动时刻。不动时刻的规范为：小鼠中止挣扎浮在水中坚持不动，或只是做一些必要的细微动作坚持头部浮在水面上。
1.6 小鼠自发活动[12]
小鼠末次给药今后，将小鼠放进自主活动箱的测定小室里，先习惯5min，然后纪录小鼠在活动室的活动状况，记载时刻为10 min。小鼠自发活动的记载规范：小鼠的爪子触摸或脱离底部的不锈钢横栅时发作的与小鼠自主活动成份额的电脉冲，这些电脉冲直接转换成小鼠的活动次数显现在数据窗中。
1.7 小鼠脑内单胺递质及其代谢产品含量测定[13]
给药后（漆黄素， ig；氟西汀或胡椒碱， ip），将小鼠快速断头处死，依照小鼠脑图谱在冰板上敏捷别离出双侧的海马、额叶皮层和杏仁核，称重后放入-80℃冰箱中保存。依照每100 mg脑安排中参加200 μL严寒的 0.4 mol/L HClO4溶液（溶液A），然后在冰上进行超声匀浆，接着4℃暗处静置60min，低温快速离心20 min（12，000 rpm，4 ℃），取上清液，参加上清液1/2量体积的B液，混匀，4℃暗处静置60 min，再次低温高速离心20 min（12，000 rpm，4℃），丢掉沉积。样品上清液经过滤器过滤处理后（过滤器的孔径巨细为0.22 μm），取20 μL自动进样。本试验选用的色谱柱为Diamonsilim C18（规范：150 mm×4.6 mm ID， 5 μm），活动相配方：125 mmol/L 枸橼酸-柠檬酸钠缓冲液（pH = 4.3）0.1 mmol/L EDTA， 1.2 mmol/L辛烷基磺酸钠，16%甲醇。活动相装备：依照以上的活动相配方称取药品，放入容器中，溶解均匀后用容量瓶定容，然后用0.22μm滤膜过滤，超声20 min后进行试验。活动相的流速为1.0 mL/min 。选用电化学检测器进行检测，脑安排中单胺及其代谢产品的含量以ng/g 湿安排重标明。
1.8 小鼠单胺氧化酶活性的测定[13]
小鼠末次给药今后快速断头处死，别离出脑安排，然后称重放入EP管中，将此EP管刺进小碎冰里，接着在EP管中参加严寒的4 mL磷酸缓冲液（pH = 7.8， 0.05 mol/L ），避免安排里单胺氧化酶活性降解，一切的操作都必须在冰上操作。然后在冰上进行匀浆制成脑安排匀浆液，接着在2.5mL磷酸缓冲液中参加20%曲通0.4 mL与安排匀浆液0.2 mL，涡旋器混匀，然后在38 ℃孵育箱中预孵育10 min， 参加30 μL 2.19 mmol/L 底物（终浓度为22 μmol/L），37 ℃孵育箱中孵育30 min，再参加0.2 mL 5 mol/L 高氯酸溶液，冷却后并离心（1500× g，10 min），取出0.5 mL上清液，然后参加浓度为1 mol/L 氢氧化钠溶液 2.5 mL，混匀并运用荧光分光光度计测定产品4-氢喹啉的荧光强度。单胺氧化酶的活性以nmol/（30min ·mg） protein标明。本试验中的安排蛋白浓度选用Bradford法来测定。
1.9 计算学处理办法
数据选用SPSS16.0计算软件包进行计算学处理，计量材料以均数±规范差标明，药物效果及其组间差异选用单要素方差（One-way ANOVA）办法剖析中的Dunnett t查验剖析，当P < 0.05时 视为有计算学含义。
2 成果
2.1 漆黄素和胡椒碱联合用药在小鼠悬尾试验中的效果
成果图1显现，与空白对照组比较，小鼠悬尾试验中漆黄素和胡椒碱联合用药组（Pip + Fisetin 1.25 mg/kg，2.5 mg/kg，5 mg/kg，）可以削减小鼠悬尾试验中的不动时刻，具有计算学含义[F（4，35）=3.361，P=0.02<0.05 ]。阳性对照药氟西汀组能显着削减不动时刻。
2.2 漆黄素和胡椒碱联合用药在小鼠逼迫游水试验中的效果
成果如图2显现，在逼迫游水试验中，与空白对照组比较，漆黄素和胡椒碱联合用药组（Pip+Fisetin 1.25 mg/kg，2.5 mg/kg，5 mg/kg ）可以削减小鼠逼迫游水试验中的不动时刻，具有计算学含义[F（4，35）=3.794，P=0.011<0.05]。其效果效果与阳性对照样氟西汀类似。
2.3漆黄素和胡椒碱联合用药在小鼠自发活动中的效果
试验成果如图3所示，与空白对照组比较，在自发活动中，漆黄素和胡椒碱联合给药组（Pip+ Fisetin1.25 mg/kg，2.5 mg/kg，5 mg/kg）没有显着差异，从这个成果得出可以扫除药物的假阳性成果。
2.4 小鼠脑内单胺递质及其代谢产品含量的改动
如表1所示，在小鼠海马中，与空白对照组比较，漆黄素和胡椒碱联合用药组（Pip + Fisetin 2.5 mg/kg， Pip + Fisetin 5 mg/kg，ig）和氟西汀组（10 mg/kg， ip）均添加海马中5-HT的含量，具有计算学含义[F（4，35）=5.170， P=0.0006<0.01]；去甲肾上腺素水平也添加，具有计算学含义[F（4，35）=4.312，P=0.002<0.01] 。
如表2所示，在额叶皮层中，与空白对照组比较，漆黄素和胡椒碱联合用药组（Pip + Fisetin 2.5 mg/kg ， Pip + Fisetin 5 mg/kg， ig）和氟西汀组（10 mg/kg， ip）添加5-HT的含量，具有计算学含义[F（4，35）=3.968， P=0.036<0.05]；去甲肾上腺素水平也添加，具有计算学含义[F（4，35）=3.411， P=0.04<0.05）]。
如表3所示，在杏仁核中，与空白对照组比较，漆黄素和胡椒碱联合用药组（Pip + Fisetin 2.5 mg/kg， Pip + Fisetin 5 mg/kg，ig）和氟西汀组（10 mg/kg，ip）均添加5-HT的含量，具有计算学含义[F（4，35）=4.668， P=0.002<0.01 ]；去甲肾上腺素水平也添加，具有计算学含义[F（4，35）=3.156， P=0.014<0.05] 。
2.5 漆黄素和胡椒碱联合用药对小鼠单胺氧化酶活性的影响
成果如表4所示，与空白对照组比较，漆黄素和胡椒碱联合用药组（Pip + Fisetin1.25 mg/kg，2.5 mg/kg，5 mg/kg）可以按捺单胺氧化酶A的活性，而且具有计算学含义[F（4，35）=4.199，P=0.0028<0.01] ，可是对单胺氧化酶B没有效果。此成果和单胺氧化酶A按捺剂吗氯贝胺的效果类似。
3评论
许多研讨标明，郁闷症具有必定的遗传性，临床研讨显现大约40%～50%郁闷症患者来源于基因的遗传，可是郁闷症发病机制杂乱，其触及到机体交感神经、免疫系统和内分泌系统等多个方面。现在研讨标明经过药物的联合运用来医治郁闷症具有以下优势：削减药物临床不良反响，戒断综合征[14，15]以及对心思的损伤效果，快速地进步药物效果。本研讨从2011年1月～2013年12月份选用漆黄素和胡椒碱的联合运用，从行为学、分子生物学的视点来阐明联合用药的药理效应及其效果靶点。
当人类处于无法改动的恶劣环境条件下，郁闷症患者愈加倾向于体现出消沉状况。在抗郁闷样效果的研讨中，行为学试验具有重要的效果，小鼠悬尾试验和小鼠逼迫游水试验是点评郁闷样行为的经典模型，经过调查其不动时刻可以断定药物的抗郁闷样效应而且断定其效果靶标[16，17]。本试验的成果标明，漆黄素与胡椒碱联合运用能显着削减小鼠在悬尾试验（TST）和逼迫游水试验（FST）的不动时刻，阐明漆黄素和胡椒碱联合运用具有抗郁闷样效果。而且本试验发现与单用各个剂量的漆黄素比较，本研讨中成果未显现，Pip 2.5 mg/kg+Fisetin 5 mg/kg的联合运用与单用Fisetin（20 mg/kg）的抗郁闷样行为效果适当，阐明阈下剂量的胡椒碱能增强漆黄素的抗郁闷活性。一起，为扫除药物中枢振奋效果形成的假阳性成果，本研讨调查了漆黄素和胡椒碱的联合运用对小鼠自主活动的影响。成果显现，在发作抗郁闷样效果的剂量范围内，该联合用药对小鼠自主活动次数没有显着影响，可扫除假阳性的成果，进一步证明漆黄素和胡椒碱联合用药的抗郁闷效果。
很多研讨标明，郁闷症患者体内5-羟色胺和儿茶酚胺类神经递质的降解添加，然后在体内的表达削减。现代神经生物学的近期研讨发现，应激诱导的大鼠郁闷模型中额叶皮层体积的缩小和突触相关蛋白表达的削减与脑区中5-HT及5-HT受体的反常密切相关[18]。别的，一些郁闷症的体现如关于自动或许活跃应对的行为削减以及被迫或许消沉应对的行为添加，这些体现与去甲肾上腺素（NE）和5-羟色胺（5-HT）的含量密切相关。5-HT是人体内的神经递质，其在生理和病理过程中具有重要的效果，如调理心情、学习、睡觉和性行为等，这些在重型的郁闷症患者中都能体现出反常特征。别的，缓慢应激引起的郁闷样行为学的改动（认知和行为发作妨碍）与脑内5-HT神经递质的改动密切相关[19]。文献报导经过削减脑区内5-HT的降解，激动5-HT受体，进步胞内AC-cAMP的活性和CREB活性具有改进郁闷样的效果[20]，因而5-HT在发挥抗郁闷样效果中具有重要的效果。前期研讨标明漆黄素可以经过按捺单胺氧化酶活性来添加脑内的单胺递质水平，然后来改进郁闷样行为学的改动[21]。可是漆黄素的生物活性比较低，一起胡椒碱是一种生物活性增强剂，能进步其他药物的生物利费用。因而本试验经过调查脑区的单胺递质水平的改动来寻觅其联合用药的效果靶标，成果发现，低剂量漆黄素（2.5 mg/kg和5 mg/kg）与阈下剂量胡椒碱合用能剂量依赖性进步小鼠海马、额叶皮层和杏仁核的5-HT水平，这与阳性对照药氟西汀的成果类似；漆黄素（5 mg/kg）与阈下剂量胡椒碱合用后可添加该三个脑区中去甲肾上腺素（NE）的含量。研讨标明，海马、额叶皮层和杏仁核中单胺递质的改动与动物的情感、动机、学习和回忆行为有密切联系[22]。现在选用的传统的抗郁闷药是经过按捺神经递质再吸取或削减其降解然后添加去甲肾上腺素的含量。依据行为学和单胺递质的成果，漆黄素与胡椒碱的协同效果可能是经过脑内单胺递质（去甲肾上腺素和5-羟色胺）代谢的调理，然后来拮抗郁闷症的发作。这个与现在研讨较多的5-羟色胺和去甲肾上腺素重吸收按捺剂或许选择性5-羟色胺或去甲肾上腺素重吸收按捺剂的机制类似，都是经过添加脑内的单胺类神经递质水平来改进郁闷症状。
改进郁闷症除了可以经过添加突触内的神经递质水平，也可以经过按捺单胺氧化酶来添加突触空隙中的神经递质含量。单胺氧化酶是一类可以催化降解单胺神经递质如5-羟色胺，去甲肾上腺素和多巴胺的线粒体结合同工酶[23]。依据底物的特异性和对按捺剂的敏感性单胺氧化酶可以分为MAO-A和MAO-B两类。其间单胺氧化酶-A主要是代谢脑区内与郁闷密切相关的去甲肾上腺素和5-羟色胺，单胺氧化酶-B主要是代谢多巴胺和去甲肾上腺素[24]。现在临床上抗郁闷药物基本上是经过按捺单胺氧化酶的活性（如吗氯贝胺）和添加中枢神经递质水平（如丙咪嗪）来到达抗郁闷效果的[25]。可是单胺氧化酶按捺剂比三环类抗郁闷药（丙咪嗪）的效果更好。为了证明漆黄素和胡椒碱的联合用药是否经过按捺单胺氧化酶的活性来添加中枢突触内的单胺递质水平，本试验测定了用药后脑安排的单胺氧化酶活性。成果发现，漆黄素与阈下剂量胡椒碱联合用药可以按捺单胺氧化酶-A的活性，这与各个脑区中单胺递质水平的改动共同。与单胺氧化酶A不同，漆黄素与胡椒碱的联合运用对MAO-B的活性没有太大的影响。以上对单胺氧化酶活性的效果与阳性对照药吗氯贝胺的效果成果类似。进一步阐明晰漆黄素与胡椒碱联合运用可能是经过按捺脑内单胺氧酶的活性来添加脑内突触中单胺递质的水平来改进郁闷样行为学。此外，新式的选择性MAO-AB按捺剂如TV-3326具有抗郁闷样效果，可是不会发作“奶酪”反响（例如，急性高血压和头痛）。阐明单胺氧化酶按捺剂为医治郁闷症供给了杰出的效果效果。
在小鼠逼迫游水和小鼠悬尾试验中发现漆黄素和阈下剂量的胡椒碱联合运用具有显着的抗郁闷样效果，该效果可能与中枢单胺能神经系统有关。本研讨发现漆黄素和胡椒碱的联合运用可能是经过按捺MAO-A活性来调理脑内5-羟色胺和去甲肾上腺素的递质代谢来发挥抗郁闷样效果。由此，经过联合运用胡椒碱添加漆黄素的药理效果，为削减药物的毒副效果，开发新式高效的天然抗郁闷药供给了新的思路，后续的研讨将进一步从机制通路来标明其抗郁闷样效果，并寻觅新的药物效果靶点。
[参考文献]
[1] Lee E， Schechter， Robert H Ring， et al. Innovative approaches for the development of antidepressant drugs： current and future strategies[J]. The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics， 2005， 2（4）：590-611.
[2] FábregasB，MouraA，Avila R，et al. serotonin-norepinephrine reuptake inhibitor desvenlafaxine for the treatment of interferon alfa-associated depression in patients with hepatitis C[J]. Rev Bras Psiquiatr，2014， 36（2）：183.
[3] El-Hage w， Leman S， Camus V， et al. Mechanisms of antidepressant resistance[J]. Front Pharmacol，2013，4：146.
[4] Khan N， Syed DN， Ahmad N， et al. Fisetin： a dietary antioxidant for health promotion[J]. Antioxid Redox Signal，2013， 19（2）：151-162.
[5] Cho N， Lee KY， Huh J， et al. Cognitive-enhancing effects of Rhus verniciflua bark extract and its active flavonoids with neuroprotective and anti-inflammatory activities[J]. Food Chem Toxicol， 2013， 58：355-61.
[6] Maher P， Akaishi T， Abe K. Flavonoid fisetin promotes ERK-dependent long-term potentiation and enhances memory[J]. Proc Natl Acad Sci USA， 2006， 103（44）：16568-16573.
[7] Lee SA， Hong SS， Han XH， et al. Piperine from the fruits of piper longum with inhibitory effect on monoamine oxidase and antidepressant-like activity[J]. Chem Pharm Bull （Tokyo）， 2005， 53（7）：832-835.
[8] Johnson JJ， Nihal M， Siddiqui IA， et al. Enhancing the bioavailability of resveratrol by combining it with piperine[J]. Nutr Food Res， 2011， 55：169-176.
[9] Kulkarni SK， Bhutani MK， Bishnoi M. Antidepressant activity of curcumin： involvement of serotonin and dopamine system[J]. Psychopharmacology（Berl），2008，201（3）：435-442.
[10] Ying Xu， Lu Zhang， Tuo Shao， et al. Ferulic acid increase pain threshold and ameliorates depression-like and neurobiological analyses[J]. Metab Brain Dis， 2013， 28（4）：571-583.
[11] Xing Ma， Rui Wang， Xin Zhao， et al. Antidepressant-like effect of flaxseed secoisolariciresinol diglycoside in ovariectomized mice subjected to unpredictable chronic stress[J]. Metab Brain Dis， 2013， 28（1）：77-84
[12] Wu Huang， Zhuoyou Chen， Qiandong Wang， et al. Piperine potentiates the antidepressant-like effect of trans-resveratrol： involvement of monoaminergic system[J]. Metab Brain Dis， 2013， 28（4）：585-595.
[13] Yingcong Yu， Rui Wang， Chunbai Chen， et al. Antidepressant-like effect of trans-resveratrol in chronic stress model behavioral and neurochemical evidences[J]. J Psychiatr Res， 2013， 47（3）：315-322.
[14] Lam RW， Wan DD， Cohen NL，et al. Combining antidepressants for treatment-resistant depression： a review[J]. J Clin Psychiatr， 2002， 63（8）：685-693.
[15] Rubio G， San L， López-Mu oz F， et al. Reboxetine adjunct for partial or nonresponders to antidepressant treatment[J]. J Affect Disord， 2004， 81（1）：67–72.
[16] Junzo K， Shigeo M， Kayo M， et al. Effects of selective serotonin reuptake inhibitors on immobility time in the tail suspension test in streptozotocin-induced diabetic mice[J]. Pharmacol Biochem Behav， 2003， 75（2）： 247-254.
[17] Chen HX， Jin ZL， Zhang LM， et al. Antidepressant-like activity of YL-0919： A novel combined selective serotonin reuptake inhibitor and 5-HT1A receptor agonist[J]. PLoS One， 2013， 8（12）：e83271.
[18] Reines A， Cereseto M， Ferrero A， et al. Maintenance treatment with fluoxetine is necessary to sustain normal levels of synaptic markers in an experimental model of depression： correlation with behavioral response[J]. Neuropsychopharmacology， 2008， 33（8）： 1896–1908.
[19] Mahar I， Bambico FR， Mechawar N，et al. Stress， serotonin， and hippocampal neurogenesis in relation to depression and antidepressant effects[J]. Neurosci Biobehav Rev，2014， 38：173-192.
[20] Xu Y， Li S， Vermon MM， et al. Curcumin prevents corticosterone-induced neurotoxicity and abnormalities of neuroplasticity via 5-HT receptor pathway[J]. J Neurochem， 2011， 118（5）：784-95.
[21] Zhen L， Zhu J， Zhao X， et al. The antidepressant-like effect of fisetin involves the serotonergic and noradrenergic system[J]. Behav Brain Res， 2012，228（2）：359-366.
[22] Butterweck V， Bockers T， Korte B， et al. Long-term effects of St. Johns wort and hypericin on monoamine levels in rat hypothalamus and hippocampus[J]. Brain Res， 2002， 930（1-2）： 21-29.
[23] Schwartz TL. A neuroscientific update on monoamine oxidase and its inhibitors[J]. CNS Spectr， 2013， 18 Suppl 1：25-32.
[24] Foley P， Gerlach M， Youdim MB， et al. MAO-B inhibitors： multiple roles in the therapy of neurodegenerative disorders[J]. Parkinsonism Relat Disord，2000，6（1）：25-47.
[25] Bhutani MK， Bishnoi M， Kulkarni SK. Anti-depressant like effect of curcumin and its combination with piperine in unpredictable chronic stress-induced behavioral， biochemical and neurochemical changes[J]. Pharmacol Bioch em Behav， 2009， 92（1）：39-43.
[26] 罗岚， 刘蒸， 廖端芳.姜黄素与缓慢心力衰竭的联系研讨进展[J]. 医学总述，2013，19（6）：142-145.
（收稿日期：2014-05-07）
[14] Lam RW， Wan DD， Cohen NL，et al. Combining antidepressants for treatment-resistant depression： a review[J]. J Clin Psychiatr， 2002， 63（8）：685-693.
[15] Rubio G， San L， López-Mu oz F， et al. Reboxetine adjunct for partial or nonresponders to antidepressant treatment[J]. J Affect Disord， 2004， 81（1）：67–72.
[16] Junzo K， Shigeo M， Kayo M， et al. Effects of selective serotonin reuptake inhibitors on immobility time in the tail suspension test in streptozotocin-induced diabetic mice[J]. Pharmacol Biochem Behav， 2003， 75（2）： 247-254.
[17] Chen HX， Jin ZL， Zhang LM， et al. Antidepressant-like activity of YL-0919： A novel combined selective serotonin reuptake inhibitor and 5-HT1A receptor agonist[J]. PLoS One， 2013， 8（12）：e83271.
[18] Reines A， Cereseto M， Ferrero A， et al. Maintenance treatment with fluoxetine is necessary to sustain normal levels of synaptic markers in an experimental model of depression： correlation with behavioral response[J]. Neuropsychopharmacology， 2008， 33（8）： 1896–1908.
[19] Mahar I， Bambico FR， Mechawar N，et al. Stress， serotonin， and hippocampal neurogenesis in relation to depression and antidepressant effects[J]. Neurosci Biobehav Rev，2014， 38：173-192.
[20] Xu Y， Li S， Vermon MM， et al. Curcumin prevents corticosterone-induced neurotoxicity and abnormalities of neuroplasticity via 5-HT receptor pathway[J]. J Neurochem， 2011， 118（5）：784-95.
[21] Zhen L， Zhu J， Zhao X， et al. The antidepressant-like effect of fisetin involves the serotonergic and noradrenergic system[J]. Behav Brain Res， 2012，228（2）：359-366.
[22] Butterweck V， Bockers T， Korte B， et al. Long-term effects of St. Johns wort and hypericin on monoamine levels in rat hypothalamus and hippocampus[J]. Brain Res， 2002， 930（1-2）： 21-29.
[23] Schwartz TL. A neuroscientific update on monoamine oxidase and its inhibitors[J]. CNS Spectr， 2013， 18 Suppl 1：25-32.
[24] Foley P， Gerlach M， Youdim MB， et al. MAO-B inhibitors： multiple roles in the therapy of neurodegenerative disorders[J]. Parkinsonism Relat Disord，2000，6（1）：25-47.
[25] Bhutani MK， Bishnoi M， Kulkarni SK. Anti-depressant like effect of curcumin and its combination with piperine in unpredictable chronic stress-induced behavioral， biochemical and neurochemical changes[J]. Pharmacol Bioch em Behav， 2009， 92（1）：39-43.
[26] 罗岚， 刘蒸， 廖端芳.姜黄素与缓慢心力衰竭的联系研讨进展[J]. 医学总述，2013，19（6）：142-145.
（收稿日期：2014-05-07）
[14] Lam RW， Wan DD， Cohen NL，et al. Combining antidepressants for treatment-resistant depression： a review[J]. J Clin Psychiatr， 2002， 63（8）：685-693.
[15] Rubio G， San L， López-Mu oz F， et al. Reboxetine adjunct for partial or nonresponders to antidepressant treatment[J]. J Affect Disord， 2004， 81（1）：67–72.
[16] Junzo K， Shigeo M， Kayo M， et al. Effects of selective serotonin reuptake inhibitors on immobility time in the tail suspension test in streptozotocin-induced diabetic mice[J]. Pharmacol Biochem Behav， 2003， 75（2）： 247-254.
[17] Chen HX， Jin ZL， Zhang LM， et al. Antidepressant-like activity of YL-0919： A novel combined selective serotonin reuptake inhibitor and 5-HT1A receptor agonist[J]. PLoS One， 2013， 8（12）：e83271.
[18] Reines A， Cereseto M， Ferrero A， et al. Maintenance treatment with fluoxetine is necessary to sustain normal levels of synaptic markers in an experimental model of depression： correlation with behavioral response[J]. Neuropsychopharmacology， 2008， 33（8）： 1896–1908.
[19] Mahar I， Bambico FR， Mechawar N，et al. Stress， serotonin， and hippocampal neurogenesis in relation to depression and antidepressant effects[J]. Neurosci Biobehav Rev，2014， 38：173-192.
[20] Xu Y， Li S， Vermon MM， et al. Curcumin prevents corticosterone-induced neurotoxicity and abnormalities of neuroplasticity via 5-HT receptor pathway[J]. J Neurochem， 2011， 118（5）：784-95.
[21] Zhen L， Zhu J， Zhao X， et al. The antidepressant-like effect of fisetin involves the serotonergic and noradrenergic system[J]. Behav Brain Res， 2012，228（2）：359-366.
[22] Butterweck V， Bockers T， Korte B， et al. Long-term effects of St. Johns wort and hypericin on monoamine levels in rat hypothalamus and hippocampus[J]. Brain Res， 2002， 930（1-2）： 21-29.
[23] Schwartz TL. A neuroscientific update on monoamine oxidase and its inhibitors[J]. CNS Spectr， 2013， 18 Suppl 1：25-32.
[24] Foley P， Gerlach M， Youdim MB， et al. MAO-B inhibitors： multiple roles in the therapy of neurodegenerative disorders[J]. Parkinsonism Relat Disord，2000，6（1）：25-47.
[25] Bhutani MK， Bishnoi M， Kulkarni SK. Anti-depressant like effect of curcumin and its combination with piperine in unpredictable chronic stress-induced behavioral， biochemical and neurochemical changes[J]. Pharmacol Bioch em Behav， 2009， 92（1）：39-43.
[26] 罗岚， 刘蒸， 廖端芳.姜黄素与缓慢心力衰竭的联系研讨进展[J]. 医学总述，2013，19（6）：142-145.
（收稿日期：2014-05-07）
