茺蔚子别号:中药茺蔚子编造工艺优化的研讨

来源:中国当代医药 ·2018年12月25日 22:31 浏览量:0

李智萌 张彦飞 蔡广知等

[摘要] 意图 改善中药茺蔚子的编造工艺,调查影响中药茺蔚子的编造要素。 办法 规划正交试验,调查中药茺蔚子的酒炒工艺,并对其进行多要素剖析。调查规范以茺蔚子中盐酸水苏碱为目标,选用高效液相色谱结合蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)对其进行含量测定,选用方差剖析等统计学办法剖析数据,找出最佳的优化计划。 成果 水煎煮提取的最佳工艺为A1B3C3,即加水煎煮3次,第1次加8倍量水,浸泡1 h,煎煮1.5 h;第2次加6倍量水,煎煮1.5 h,第3次加6倍量水,煎煮1.5 h,滤过,兼并滤液。编造最佳工艺为A3B2C1D3,即运用25%加酒量滋润茺蔚子药材10 min后,将其在150℃下炒制5 min后即得。 定论 编造的办法直接影响中药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量,本研讨为改善中药茺蔚子的最佳编造工艺供给了参阅根据。

[关键词] 茺蔚子;编造工艺优化;盐酸水苏碱;高效液相色谱结合蒸发光散射检测器

[中图分类号] R283 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2015)05(c)-0016-04

[Abstract] Objective To improve the processing technology of the Chinese traditional medicine Motherwort fruit,and investigate the factors influencing for the processing of Chinese traditional medicine Motherwort fruit. Methods The orthogonal experiment was designed to investigate the fried wine processing of Chinese traditional medicine Motherwort fruit,and the multiple-factor analysis was given.Standard for Motherwort fruit was used Hydrochloric acid stachydrine as the index,which was used HPLC-ELSD to determine the content and the data were analyzed statistically by analysis of variance to find out the optimal scheme. Results Optimum water decoction was extracted for A1B3C3,was decocted three times,the first with 8 times amount of water,soaked for 1 h,boiled for 1.5 h;second times with 6 times amount of water,boiled for 1.5 h,third times with 6 times amount of water,decocted for 1.5 h,and then filtered and merged filtrate.The best processing technology for A3B2C1D3 was infiltrated 25% for liquor 10 min and under 150℃ fried for 5 min to obtain. Conclusion The processing methods is a direct impact on the content of stachydrine hydrochloride in Motherwort fruit,this study provides reference for optimizing the best processing method of Motherwort fruit.

[Key words] Motherwort fruit;Optimal processing method;Hydrochloric acid Stachydrine;HPLC-ELSD

中药茺蔚子又叫益母草子,为唇形科植物益母草(Leonurus japonicus Houtt.)的枯燥老练果实[1]。药材多秋季果实老练时采割地上部分,晾干,打下果实,除掉杂质。该中药首载于《神农本草经》,味辛、苦,性微寒。归心包、肝经,具有活血调经、清肝明意图功用,用于目赤胀痛或目生翳膜,酒炒品医治喽罗之疾最佳[2-4]。“炒制”和“净制”两种编造办法是现在中药茺蔚子的首要编造办法。为传承其编造理论和优化其编造办法,进一步使中药茺蔚子更好地发挥成效,本研讨以酒炒法为首要办法,调查影响酒炒工艺的要素和水平,选用正交试验的办法进一步优化和改善编造工艺办法,对不同编造办法制得的编造样品进行试验比较。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪(LC-10ATvP型,日本岛津公司),蒸发光散射检测器(上海剖析仪器有限公司),空气压缩泵(天津市剖析仪器厂),超声波提取器(上海剖析仪器有限公司),85-2A数显测速恒温磁力搅拌器(金坛市荣华仪器制造有限公司),80-2型电动离心机(江苏金坛市金国胜试验仪器公司),百万分之一电子天平,十万分之一电子天平;水为超纯水,磷酸、乙腈为色谱纯;盐酸水苏碱对照品(批号:110710-201310,规范为20 mg,我国药品生物制品判定所)。

茺蔚子药材[5],经长春中医药大学姜大成教授判定为真品。

2 办法与成果

2.1 对照品溶液的制备

取盐酸水苏碱对照品适量,精细称定,置棕色量瓶中,加70%乙醇制成每1毫升含0.5 mg的溶液,即得。

2.2 供试品溶液的制备

取研磨后的茺蔚子粉末过四号筛,取过筛后的药材粉末约0.25 g,精细称定后记载其精确分量,转入彻底枯燥的50 ml具塞锥形瓶中,精细参加70%乙醇25 ml,加塞,精细称定分量,记载,置入超声提取器中(频率40 kHz,功率250 W)处理30 min,待彻底放冷后,再精细称定其分量,运用70%乙醇补足与第1次称量比较削减的分量,充沛摇匀,置入漏斗中滤过,弃除滤液,精细取必定量续滤液,70%乙醇定容后即为供试品溶液[6-8]。

2.3 规范曲线的调查

取盐酸水苏碱对照品,精细称4.87 mg,彻底转入10 ml棕色容量瓶中,先加必定量70%乙醇溶解,待溶解彻底后,继续加乙醇定容至刻度,充沛摇匀,即得(每1毫升含盐酸水苏碱对照品0.487mg)。别离精细汲取上述盐酸水苏碱对照品溶液1、3、5、7、9 μl,注入液相色谱仪,别离记载相应的峰面积值,其间,横坐标为进样量(μg)取对数后的值(X),纵坐标为峰面积积分取对数后的值(Y),制造规范曲线图(图1)。成果回归方程为Y=1.5503X+2.1495,r=0.9999,提示,盐酸水苏碱线性规模为0.487~4.383 μg时,进样量的对数值与峰面积积分的对数值之间有杰出的线性关系[9-11]。

2.4 茺蔚子提取办法的调查

遵从中药汤剂的煎煮办法,断定水作为提取溶剂,提取办法挑选热法提取,即煎煮法,且固液别离时应留意趁热滤过,使药效物质较少丢失,以确保较高的提取率及临床效果[12-13]。根据上述准则,对水煎煮提取工艺条件进行试验研讨。试验调查了3个要素包含药材的加水量、煎煮时刻及煎煮次数,其间每个要素调查了3个水平,根据要素和水平规划L9(34)的正交试验(表1),考虑到试验中可能存在差错的影响,每次试验平行3次。其间药材的浸泡时刻选用单要素试验法,以直观调查进行点评;其他要素采纳L9(34)正交规划试验法,以茺蔚子中有效成分盐酸水苏碱的含量为调查目标,优选最佳提取工艺参数。由方差剖析表可知各要素影响的重要性次序为B>C>A,提示对试验有显着性影响的首要要素为煎煮次数和煎煮时刻,即首要影响要素是煎煮次数B和煎煮时刻C,加水量A对试验成果影响较小,结合出产实际情况及试验操作,挑选A1。归纳剖析成果,断定最佳提取工艺条件为A1B3C3,即加水煎煮3次,第1次加水8倍量,浸泡1 h,煎煮1.5 h,趁热滤过;第2次加水6倍量,煎煮1.5 h,趁热滤过;第3次加水6倍量,煎煮1.5 h,趁热滤过,兼并滤液,即为供试品溶液(表2、表3)。

2.5 茺蔚子酒炒工艺的调查

茺蔚子酒炒工艺规划调查了酒炒温度、酒炒时刻、滋润时刻和加酒量4个要素,每个要素别离设了3个水平,根据要素和水平规划了L9(34)正交试验表(表4)。考虑到试验中可能存在差错的影响,每次试验平行3次[14-16]。运用最佳提取办法对编造后茺蔚子进行提取,根据编造后盐酸水苏碱含量优选编造办法。正交试验的直观剖析见表5,成果显现,编造要素的主次为D>A>C >B,根据试验实际操作需求断定最佳组合为A3B1C1D3。由方差剖析成果(表6)可知各要素影响试验成果的重要显着要素为A和D,因为B对试验影响不显着,故将其列入差错项处理。根据终究测得盐酸水苏碱含量和饮片外形特征为首要参阅目标,A3B2C1D3为终究挑选的最佳编造工艺,即运用25%加酒量滋润茺蔚子药材10 min后,将其在150℃下炒制5 min后即得。

2.6 茺蔚子不同编造品总浸膏量、盐酸水苏碱含量测定

取不同编造品200 g,加水煎煮3次,第1次加8倍量水(其间2倍量是药材的吸水量),浸泡1 h,煎煮1.5 h;第2次加6倍量水,煎煮1.5 h;第3次加6倍量水,煎煮1.5 h,滤过兼并滤液,比较不同编造办法的浸膏量和盐酸水苏碱的含量。由试验成果能够看出,与生品比较,酒炒品总浸膏量、盐酸水苏碱含量差异显着(P<0.01)(表7),可见酒炒品在盐酸水苏碱含量上较高,阐明优化后的酒炒工艺的确提高了编造饮片的质量。

2.7 办法学调查

2.7.1 精细度试验 别离精细汲取已处理的供试品溶液及盐酸水苏碱对照品溶液各5 ml注入液相色谱仪,别离接连进样6次,依照上述色谱条件进行测定其峰面积,核算其相应的峰面积积分值可知,对照品溶液和供试品溶液峰面积的RSD值别离为1.59%、2.99%,标明该试验的仪器、办法的精细度杰出[17]。

2.7.2 重复性试验 精细称取已过筛的茺蔚子药材粉末,依照“2.2”项下供试品溶液制备的办法进行处理,平行制备6份,顺次独立测定,按上述色谱条件测定峰面积,核算茺蔚子药材中盐酸水苏碱的含量,调查试验办法的重复性,测定其盐酸水苏碱含量,成果均匀含量为34.33 mg/g,RSD为1.67%,标明该试验办法具有杰出的重复性。

2.7.3 稳定性试验 每隔必定时刻,别离精细汲取茺蔚子药材供试品溶液和对照品溶液各5 μl注入液相色谱仪,依照上述色谱条件测定其峰面积,调查其稳定性。成果显现,在24 h内,测定对照品溶液和供试品溶液峰面积的RSD别离为1.84%、2.26%,标明盐酸水苏碱具有杰出的稳定性,确保了其在24 h内测定成果精确牢靠[18]。

2.7.4 加样回收率试验 精细称取茺蔚子药材样品,依照供试品制备项下办法处理,平行制备6份,且已测定其盐酸水苏碱的含量,向6份供试品中别离适量精细参加对照品,依照上述色谱条件进行测定,核算茺蔚子药材中的盐酸水苏碱加样回收率,经测定,其盐酸水苏碱均匀加样回收率为97.96%,RSD值为0.92%,提示试验办法具有杰出的精确度(表8)。

3 评论

因为茺蔚子具有活血调经、清肝明意图效果,故本试验以茺蔚子中盐酸水苏碱作为首要目标对其编造办法进行调查。优化后的酒炒法下盐酸水苏碱含量显着比生品高,可能与茺蔚子经酒制后增加了与酒相关的成分有关,炒制品的水溶性成分含量和盐酸水苏碱含量均高于生品,与中药传统编造理论中“逢子必炒”的理论是相符合的[19-20]。此外,本试验断定茺蔚子的最佳酒炒工艺为运用25%加酒量滋润茺蔚子药材10 min后,将其在150℃下炒制5 min后即得,茺蔚子的最佳酒炒工艺为茺蔚子其他编造工艺供给了参阅根据。

[参阅文献]

[1] 国家药典委员会.我国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:225.

[2] 陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[M].北京:公民卫生出版社,1997.

[3] 王宝琴.中成药质量规范与规范物质研讨[M].北京:我国医药科技出版社,1994.

[4] 吴寿金,赵泰,秦永祺.现代中草药成分化学[M].北京:我国医药科技出版社,2001.

[5] 熊佐章.HPLC法测定复方盐酸水苏碱片的含量[J].底层中药杂志,2002,16(2):11-13.

[6] 林文群,陈宏靖,陈忠.茺蔚子化学成分的研讨[J].福建师范大学学报(自然科学版),2001,17(2):84-87.

[7] 姜舜尧.益母草药材中水苏碱成分的高效液相色谱法剖析[J].药物剖析杂志,2001,21(4):243-247.

[8] 刘雅茜,王梦月,史海明,等.高效液相色谱法测定甘草及其编造品中5种活性成分的含量[J].我国药学杂志,2008,43(16):1268-1271.

[9] 孙淑琴,魏广武.不同编造办法对薏苡仁煎液的影响[J].我国中药杂志,2000,25(11):60.

[10] 杨能英,夏新华.HPLC测定小儿止咳颗粒中盐酸水苏碱的含量[J].中成药,2003,25(7):591-592.

[11] 杨怀镜,姚宏春,张全望.HPLC法测定盐酸水苏碱和复方盐酸水苏碱片的含量[J].我国药事,2003,17(3):171-172.

[12] 高建,夏泉,黄赵刚,等.HPLC-ELSD一起测定当归补血总苷中黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ[J].中成药,2012,34(2):268-272.

[13] 卢凤来,蒋海英,陈月圆,等.HPLC-ELSD法测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙[J].中成药,2013,35(8):1821-1823.

[14] 蒋小华,宾祝芳,谢运昌,等.HPLC-ELSD法一起测定红丝线中的豆甾醇和β-谷甾醇[J].中成药,2013,35(8):1711-1713.

[15] 李红燕,张蕊,冯晓川.HPLC-ELSD法测定复方枇杷止咳颗粒中桔梗皂苷D、熊果酸、齐墩果酸和贝母素甲[J].中成药,2013,35(7):1479-1484.

[16] 陈俊,黄玉凤,王彬.HPLC-ELSD在中药剖析及指纹图谱中的使用[J].药学实践杂志,2009,27(4):251-253.

[17] 张莲珠,王会弟.茺蔚子研讨进展[J].长春中医药大学学报,2012,10(28):920-921.

[18] 闫文静,仲彦颖,汪豪.HPLC-ELSD法测定川牛膝中两种三萜皂苷的含量[J].药学与临床研讨,2014,22(4):336-338.

[19] 黄勇红,黄艳萍.飞扬草药材HPLC指纹图谱研讨[J].我国试验方剂学杂志,2012,18(16):72-74.

[20] 王克英,郭思妤,祝晶,等.黔产钩藤HPLC指纹图谱的研讨[J].我国中药攻略,2012,10(35):69-70.

(收稿日期:2015-01-29 本文修改:卫 轲)

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