外周T细胞淋巴瘤:哮喘患儿外周血CD4+CD25+调理性T细胞的测定及临床意义

来源:中国现代医生 ·2018年12月30日 00:35 浏览量:0

湛洁谊 卢慧敏 林穗玲

[摘要] 意图 评论CD4+CD25+调理性T细胞在哮喘儿童外周血中的份额改动,并评论其临床含义。 办法 150例哮喘患儿按临床体现分为急性发生组(50例)、临床缓解期组(50例)和咳嗽变异性哮喘组(50例),另挑选50名健康儿童为正常对照组。运用流式细胞仪检测上述各组外周血CD4+CD25+调理性T细胞占CD4+T细胞的百分比。 成果 急性发生期组患儿外周血CD4+CD25+调理性T细胞水平较缓解组、咳嗽变异性哮喘组及健康对照组显着下降(P<0.05),而缓解期组及咳嗽变异性哮喘组与健康对照组比较差异无统计学含义(P>0.05)。定论CD4+CD25+调理性T细胞可能参加了哮喘的发生与开展,哮喘的严峻程度可能与CD4+CD25+调理性T细胞的水平相关。

[关键词] 哮喘;儿童;调理性T细胞;流式细胞术

[中图分类号] R562.25 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2014)25-0010-03

支气管哮喘是由多种炎性细胞和炎性介质参加的气道缓慢炎症性疾病。CD4+CD25+调理性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一类调理或按捺其他免疫细胞功用的细胞,在本身免疫性疾病、感染性疾病、过敏性疾病以及肿瘤免疫中都发挥着效果。近年来,研讨材料显现,CD4+CD25+调理性T细胞在哮喘的发病中可能起着重要效果。本文经过检测不一起期及不同类型哮喘患者外周血CD4+CD25+Treg的表达水平,评论该细胞表达水平与哮喘发病的联系。

1 目标与办法

1.1研讨目标

挑选2010~2013年广州医科大学隶属榜首医院儿科门诊哮喘患者150例,均契合2008年中华医学会儿科学分会呼吸学组拟定的哮喘及其分期的确诊规范[1]。急性发生期哮喘患儿50例,其中男26例,女24例,年纪2~9岁,均匀(4.982±0.263)岁;临床缓解期哮喘患儿50例,其中男27例,女23例,年纪2.5~11岁,均匀(5.308±0.275)岁;咳嗽变异性哮喘患儿50例,其中男24例,女26例,年纪3~10岁,均匀(5.160±0.249)岁。对照组50例,为广州市天河区妇幼保健院健康体检儿童,其中男25例,女25例,年纪2~10岁,均匀(5.064±0.223)岁,均无本身免疫性疾病、过敏性疾病以及肿瘤疾病史,近2个月内无感染性疾病,并在外近3个月内运用肾上腺皮质激素、免疫按捺剂或其他免疫调理剂史。各组的性别构成、年纪比较差异无统计学含义(P>0.05),见表1。

1.2首要试剂与仪器

鼠抗人的CD4-FITC,CD25-PE,及同型对照单抗,FAC lysing solution溶血素,流式细胞仪FACScanto,以上试剂及仪器均购自美国Becton Dickinson公司。剖析软件为FACSDiva software。

1.3外周血CD4+CD25+Treg的检测

抽取研讨目标外周静脉血2mL,用EDTA抗凝。取两支流式上样管,别离参加EDTA抗凝全血50 μL,榜首管加同型对照,第二管加CD4-FITC,CD25-PE,各为 10μL,室温避光孵育15~20 min,然后参加FASC 溶血素1 mL,混合后避光静置10 min,1000 r/min离心3 min,参加2 mL磷酸盐缓冲液(PBS)洗刷1次,参加适量PBS重悬细胞,流式细胞仪检测。以CD4阳性细胞设门,剖析CD4+CD25+调理性T细胞所占CD4+T细胞的百分比。

1.4统计学办法

选用SPSS11.5软件进行统计学处理,定量材料(年纪、CD4+CD25+ Treg占CD4+ T细胞的份额)用Kolmogorov-Smirnov查验法进行正态性查验,关于正态分布的数据,成果以(x±s)标明,正态分布数据经方差齐性查验后选用单因素方差剖析,方差剖析全体均数间有统计学含义时,选用S-N-K查验做组间的两两比较。定性材料(性别构成)比较选用χ2查验。

2 成果

2.1 研讨目标年纪、性别构成比较

见表1。

2.2 不同组别外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的份额比较

急性发生期哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的份额显着低于健康对照儿童、临床缓解期哮喘患儿及咳嗽变异性哮喘患儿(P<0.05)。临床缓解期哮喘患儿及咳嗽变异性哮喘患儿与健康对照儿童比较差异无统计学含义(均为P>0.05)。临床缓解期哮喘患儿与咳嗽变异性哮喘患儿比较差异无统计学含义(P>0.05)。见表2。

3 评论

CD4+CD25+Treg是CD4+T细胞的一个小的细胞亚型,具有免疫功用性和按捺性两大功用特征[2]。近年来,研讨材料显现,CD4+CD25+调理性T细胞在哮喘的发病中可能起着重要效果。它可介导机体对过敏原耐受的构成,保持免疫耐受,按捺Th2反响及气道的嗜酸性粒细胞炎症,然后下调哮喘气道炎症,终究起到避免哮喘开展的效果[3]。CD4+CD25+Treg水平已成为衡量Treg群落巨细的一个重要参数,但是,关于哮喘患者外周血CD4+CD25+Treg水平的报导尚不共同。多项研讨标明[4,5],哮喘患者支气管肺泡灌洗液、外周血单核细胞中CD4+CD25+Treg的比率显着低于健康对照组。黄花荣、陆小霞等[6,7]经过对哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg 的研讨标明,哮喘患儿急性发生期的CD4+CD25+Treg显着下降,且跟着病况的加剧呈显着削减的趋势。但也有少部分研讨以为哮喘患者外周血CD4+CD25+Treg水平与健康对照组比较无差别[8,9],乃至是升高的[10,12]。咳嗽变异性哮喘是哮喘的一种特别类型,以咳嗽为仅有或首要体现,不伴有显着喘息。毕玉田等[13]研讨发现,咳嗽变异性哮喘患者外周血的CD4+CD25+调理性T细胞的份额显着低于健康对照者。endprint

该试验研讨标明,哮喘急性发生期患儿的外周血CD4+CD25+Treg水平较临床缓解期哮喘患儿、咳嗽变异性哮喘患儿和正常对照组儿童显着下降,这与大部分的研讨定论共同,提示哮喘急性发生期患儿体内存在T调理细胞免疫功用平衡失调,导致免疫按捺功用削弱或呈低反响性,可能是引起支气管哮喘发病的机制之一。而该试验研讨也标明临床缓解期哮喘患儿及咳嗽变异性哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg水平与正常对照组比较差异无统计学含义。阐明哮喘患儿症状缓解可能与体内CD4+CD25+Treg的水平康复有关。一起咳嗽变异性哮喘患儿的病况轻,可能CD4+CD25+Treg的水平下降不显着。该试验研讨标明哮喘的严峻程度可能与CD4+CD25+Treg的水平相关,一起也存在不能单纯依托CD25+来区别调理性T细胞和效应性T细胞的可能。现在关于咳嗽变异性哮喘与CD4+CD25+Treg水平的研讨较少,需要很多的样本验证及进一步的研讨。

[参考文献]

[1] 中华医学会儿科学分会呼吸学组. 2008年修订儿童支气管哮喘确诊与防治攻略[J]. 中华儿科杂志,2008,46(10):745-753.

[2] Lloyd CM,Hawrylowicz CM. Regulatory T cells in asthma[J]. Immunity,2009,31(3): 438-449.

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[4] Xue kY, Zhou YM, Xiong SD, et al. Analysis of CD4+CD25+ regulatory T cells and Foxp3 mRNA in the peripheral blood of patients with asthma[J]. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci, 2007,27(1):31-33.

[5] 高洪媛,刘瑞娟. CD4+CD25+调理性T细胞削减对哮喘患者的影响[J]. 临床肺科杂志,2012,17(2):335-336.

[6] 黄花荣,刘甜甜,麦贤弟,等. 哮喘患儿外周血CD4+CD25+调理性T细胞的改变及其与哮喘病况的联系[J]. 新医学,2009,40(4):221-223.

[7] 陆小霞. 哮喘儿童外周血单个核细胞Tim-3 mRNA的表达及其与CD4+CD25+调理性T细胞的联系[J]. 华中科技大学学报(医学版),2011,40(1):60-63.

[8] 梁瑞韵,伍卫,黄瑾,等. 镁对哮喘患者外周血CD4+CD25+调理性T细胞凋亡及Foxp3表达的影响[J]. 我国病理生理杂志,2012,28(9):1690-1694.

[9] Ling EM,Smith T,Nguyen XD,et al. Relation of CD4+CD25+ regulatory T-cell suppression of allergen-driven T-cell activation to atopic status and expression of allergic disease[J]. Lancet,2004,363(9409):608-615.

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[11] 施胜铭,辅桓钦. 支气管哮喘患者外周血中的CD4+CD25+T淋巴细胞的改变和干涉含义[J]. 现代有用医学,2009,21(9):969-970.

[12] 沈丽华,吴晓燕. 非急性发生期哮喘患者CD4+CD25+调理性T细胞含量水平调查[J]. 我国中医药现代远程教育,2011,9(6):146-147.

[13] 毕玉田,洪新,曹国强,等. 糖皮质激素吸入诱导咳嗽变异性哮喘患者CD4+CD25+T细胞Foxp3基因表达的研讨[J]. 重庆医学,2007,36(6):511-513.

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该试验研讨标明,哮喘急性发生期患儿的外周血CD4+CD25+Treg水平较临床缓解期哮喘患儿、咳嗽变异性哮喘患儿和正常对照组儿童显着下降,这与大部分的研讨定论共同,提示哮喘急性发生期患儿体内存在T调理细胞免疫功用平衡失调,导致免疫按捺功用削弱或呈低反响性,可能是引起支气管哮喘发病的机制之一。而该试验研讨也标明临床缓解期哮喘患儿及咳嗽变异性哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg水平与正常对照组比较差异无统计学含义。阐明哮喘患儿症状缓解可能与体内CD4+CD25+Treg的水平康复有关。一起咳嗽变异性哮喘患儿的病况轻,可能CD4+CD25+Treg的水平下降不显着。该试验研讨标明哮喘的严峻程度可能与CD4+CD25+Treg的水平相关,一起也存在不能单纯依托CD25+来区别调理性T细胞和效应性T细胞的可能。现在关于咳嗽变异性哮喘与CD4+CD25+Treg水平的研讨较少,需要很多的样本验证及进一步的研讨。

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该试验研讨标明,哮喘急性发生期患儿的外周血CD4+CD25+Treg水平较临床缓解期哮喘患儿、咳嗽变异性哮喘患儿和正常对照组儿童显着下降,这与大部分的研讨定论共同,提示哮喘急性发生期患儿体内存在T调理细胞免疫功用平衡失调,导致免疫按捺功用削弱或呈低反响性,可能是引起支气管哮喘发病的机制之一。而该试验研讨也标明临床缓解期哮喘患儿及咳嗽变异性哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg水平与正常对照组比较差异无统计学含义。阐明哮喘患儿症状缓解可能与体内CD4+CD25+Treg的水平康复有关。一起咳嗽变异性哮喘患儿的病况轻,可能CD4+CD25+Treg的水平下降不显着。该试验研讨标明哮喘的严峻程度可能与CD4+CD25+Treg的水平相关,一起也存在不能单纯依托CD25+来区别调理性T细胞和效应性T细胞的可能。现在关于咳嗽变异性哮喘与CD4+CD25+Treg水平的研讨较少,需要很多的样本验证及进一步的研讨。

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[8] 梁瑞韵,伍卫,黄瑾,等. 镁对哮喘患者外周血CD4+CD25+调理性T细胞凋亡及Foxp3表达的影响[J]. 我国病理生理杂志,2012,28(9):1690-1694.

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[10] 覃寿明,施焕中,覃雪军,等. 支气管哮喘患者外周血中的CD4+CD25+T淋巴细胞的测定[J]. 中华结核和呼吸杂志,2006,29(4):252-256.

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