誉秀华++周桂桃++杨秀堂
[摘要]意图 评论Th17相关细胞因子和抗CCP抗体在类风湿性关节炎（RA）中的相关性和临床含义。办法 回忆剖析2015年1月～2016年5月在我院医治的60例RA患者，根据DAS28积分分为活动组（DAS28>3.2）32例和安稳组（DAS28≤3.2）28例，另挑选60例健康者作为对照组，用ELISA法测定血清Th17相关细胞因子（IL-17、IL-6、TGF-β1），用胶体金免疫层析法检测抗CCP抗体阳性率，比较三组测定成果。成果 抗CCP抗体阳性率：活动组>安稳组>对照组（P<0.05）。IL-17、IL-6水平：活动组>安稳组>对照组（P<0.05）。TGF-β1水平：活动组<安稳组<对照组（P<0.05）。定论 抗CCP抗体阳性率、IL-17、IL-6水平越高，RA的DAS28积分越高，而TGF-β1水平越高，RA的DAS28积分越低，因而，Th17相关细胞因子和抗CCP抗体能够进步RA确诊及活动性判别的灵敏度和特异度，为医治新策略供给根据。
[关键词]Th17相关细胞因子；抗CCP抗体；类风湿性关节炎；临床含义
[中图分类号] R593.22 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）04（c）-0153-03
[Abstract]Objective To investigate the correlation and clinical significance of Th17-related cytokines and anti-CCP antibodies in rheumatoid arthritis.Methods 60 patients with rheumatoid arthritis（RA） who were treated in our hospital from January 2015 to May 2016 were retrospectively analyzed.According to DAS28 scores，the patients were divided in to active group of 32 patients（DAS28>3.2） and stable group of 28 patients （DAS28≤3.2）.Another 60 healthy subjects were selected as the control group.Serum Th17-related cytokines （IL-17，IL-6，TGF-β1） were determined by ELISA，and the positive rate of anti-CCP antibody was detected by colloidal gold immunochromatography.The testing results were compared between the three groups.Results The positive rate of anti-CCP：active group>stable group>control group（P<0.05）.IL-17 and IL-6 levels：active group>stable group>control group（P<0.05）.TGF-β1 level：active group [Key words]Th17-related cytokines；Anti-CCP antibody；Rheumatoid arthritis；Clinical significance 类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以炎性滑膜炎为主的体系性疾病，现在发病机制没有说明，近年发病率不断攀升[1]。其特征为手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，乃至导致关节变形、功用损失。临床体现多为体重减轻、低热、疲乏无力、关节晨僵乃至多脏器体系功用危害。因为发病机制没有探明，临床多凭借血沉、C反响蛋白免疫球蛋白、类风湿因子、印象学查看等确诊，但特异度和灵敏度不高[2]。现临床上多选用非甾体抗炎药、抗风湿药、糖皮质激素等药物医治，医治周期长，且效果一般[3]。近年不断有文献报导，Th17相关细胞因子和抗CCP抗体水平与RA联系亲近[4]，因而本研讨挑选RA患者和健康者各60例，探求Th17相关细胞因子和抗CCP抗体水平在RA中的重要意義。 1材料与办法 1.1一般材料 回忆剖析2015年1月～2016年5月在我院医治的60例RA患者，归入规范：契合1987年美国风湿病学会制定的RA确诊规范[4]，未进行任何医治≥2个月，包含运用抗风湿药、非甾体抗炎药和糖皮质激素，患者自愿参与并签署知情同意书。扫除规范：兼并其他脏器（心、肾、肝、肺）器质性疾病和（或）结缔安排病。另挑选60例同期体检彻底健康的成年人作为对照组。RA患者根据DAS28积分分为活动组（DAS28>3.2）32例和安稳组（DAS28≤3.2）28例。其间活动组年纪（51.2±8.4）岁，男性10例，女人22例；安稳组年纪（50.5±9.2）岁，男性14例，女人18例；对照组年纪（51.4±8.8）岁，男性29例，女人31例。三组患者年纪、性别比较，差异无统计学含义（P>0.05），具有可比性。本研讨经我院医学道德委员会同意。
1.2办法
一切患者均在清晨空腹状况下采静脉血10 ml，经4000 r/min离心10 min，取上层血清置于-80℃冷藏保存待用，全过程用时≤30 min。Th17相关细胞因子（IL-17、IL-6、TGF-β1）经过酶联免疫吸附法（ELISA）运用相关试剂盒（上海研生实业有限公司，96T/48T）测定。①设规范孔8孔，每孔参加相应浓度25 μl规范品，余孔参加25 μl血清样品于相应孔中；②每孔参加25 μl酶联物，悄悄混匀30 s，室温温育30 min；③洗板：甩尽板内液体，用洗刷液洗刷反响板（每孔参加35 μl洗刷液），并去除水滴，重复洗刷3次；④每孔参加50 μl酶复合物，悄悄混匀30 s，室温温育30 min；⑤洗板：甩尽板内液体，用洗刷液洗刷反响板（每孔参加35 μl洗刷液），并去除水滴，重复洗刷3次；⑥每孔参加50 μl显色液，輕轻混匀10 s，室温温育15 min；⑦每孔参加50 μl停止液，悄悄混匀30 s，30 min内涵450 nm处读取OD值；⑧以OD值为纵坐标，以规范品浓度为横坐标，制作规范曲线。根据血清样品的OD值在规范曲线上查出其浓度。抗CCP抗体经过胶体金免疫层析法运用相关试剂盒（上海荣盛生物药业有限公司，沪食药监械准字2014第2400660号）检测，滴入3～4滴血清，待10 min读成果。记载抗CCP抗体阳性率。
1.3调查目标
调查比较三组患者抗CCP抗体阳性率和IL-17、IL-6、TGF-β1水平。选用胶体金免疫层析法检测抗CCP抗体，DAS28评分首要是RA疾病活动分数计算器，用来点评类风湿性关节炎活动程度。28个关节散布：双肩（2）、双肘（2）、双腕（2）、双手掌指关节（10）、双手近端指间关节（10）、双膝关节（2）。
1.4统计学办法
选用SPSS 20.0统计学软件进行数据剖析，计量材料数据用均数±规范差（x±s）表明，两组间比较选用t查验；计数材料用率表明，组间比较选用χ2查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2成果
2.1三组患者抗CCP抗体阳性率的比较
三组抗CCP抗体阳性率：活动组（81.25%）>安稳组（60.71%）>对照组（0.00%），差异有统计学含义（P<0.05）。
2.2三组患者Th17相关细胞因子的比较
测定后IL-17、IL-6水平：活动组>安稳组>对照组（P<0.05），而TGF-β1水平：活动组<安稳组<对照组，差异均有统计学含义（P<0.05）（表1）。
3评论
RA是一种以关节病变为主的缓慢全身本身免疫性疾病。据统计，在我国该病发病率为0.24%～0.5%，且近年有上升趋势，女人多于男性，2～3∶1，以20～50岁发病多见[5]。首要病理改变为小关节滑膜危害所造成的的关节胀痛，继而软骨损坏、关节空隙变窄、功用障碍，也可累及其他脏器[6]。临床体现为劳累关节晨僵、痛苦、压痛、肿胀、活动受限、乃至变形，小关节先劳累，呈对称性，其他脏器劳累则发生相应临床体现[7]。因为本病发病机制未说明，现在无彻底治愈办法，且该病易重复发生，预后不良，致残率高，对患者身心健康危害极大[8]。据近年文献报导，Th17相关细胞因子和抗CCP抗体水平与RA发病及活动性存在亲近相关，因而笔者选取我院60例RA患者，与健康者对照，探求Th17相关细胞因子和抗CCP抗体水平关于RA发病机制、确诊、医治的重要含义。
CD4+淋巴细胞可分解Th17细胞亚群，Th17细胞可排泄IL-17、IL-6、IL-22、IL-21等相关细胞因子[9]。其间IL-17在急性感染性炎症反响中，可诱导炎症因子和趋化因子表达，使免疫细胞抵达炎症部位，维护免受外界病原体危害，还能够诱导部分安排修正因子的表达，加速安排修正[10]。但据文献显现，在人体内由多种原因导致的缓慢疾病（如RA）中，IL-17呈现高表达状况，可诱导更多炎症因子表达加剧炎症反响，在患者身上体现为小关节的红、肿、痛及功用障碍，乃至危害全身其他脏器，对疾病开展起恶化效果[11]。而IL-6可影响免疫细胞的增殖、分解并进步免疫功用，一起诱导单核细胞活化、增强NK细胞活性，维护机体不受病原体危害[12]。但在RA中，IL-6可影响淋巴B细胞发生很多本身抗体，影响RF等其它细胞因子发生，加剧炎症反响和危害[13]。TGF-β1对细胞增殖、分解、免疫功用都有重要调节效果，可按捺免疫活性细胞增殖、按捺多种细胞因子诱导的抗原表达、按捺淋巴分解及细胞因子发生，与免疫功用呈拮抗联系，然后减轻炎症反响[14]。在本研讨中，RA患者的IL-17、IL-6水平明显高于健康者，且跟着炎症活动性增强，其水平越高；而RA患者TGF-β1水平明显低于健康者，且炎症活动性增强，其水平越低。经过这3个细胞因子目标能够前期确诊RA或判别RA炎症反响活动状况，论述了RA与Th17细胞宗族相关的发病机制，供给了下降IL-17、IL-6水平，进步TGF-β1水平的新的医治方向。
抗CCP抗体是确诊RA的高特异度、高灵敏度（68%～75%）目标，先于RA临床体现呈现，首要为IgG类抗体，据文献报导，在RA前期敏感度就可达50%左右，而抗CCP抗体阳性患者的骨损坏程度较阴性更严峻[15]。在本研讨中，跟着RA活动性添加，抗CCP抗体阳性率增高。反之该目标能够较精确确诊RA并反响炎症活动状况。在后期医治中，可进一步研讨下降抗CCP抗体以减轻炎症反响、缓解病况的新式医治。
综上所述，IL-17、IL-6、TGF-β1和抗CCP抗体水平在RA发病机制中有重要临床含义，能够进步RA确诊及活动性判别的灵敏度和特异度，为医治新策略供给根据。
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（收稿日期：2016-12-28 本文修改：马 越）
