黄伟强
[摘要] 意图 评论凋亡按捺蛋白Livin在结肠癌安排中的表达及与细胞增殖的联系。 办法 选取结肠癌患者术后病理标本70例，选用S-P免疫组化法检测Livin基因的表达，并评论其与患者性别、年纪、肿瘤巨细、安排分解程度、滋润深度、淋巴结搬运和远处搬运等生物学行为及细胞增殖的联系。另取30例癌旁正常的结肠安排作对照。成果 结肠癌安排中Livin基因的阳性率显着高于癌旁正常结肠安排（χ2=12.19，P <0.01）。Livin基因在结肠癌安排中表达水平与性别、年纪、肿瘤巨细及安排分解程度无关（P >0.05），随原发病灶的滋润深度、淋巴结搬运和远处搬运呈显着上升趋势（P <0.01或P <0.05）。Livin基因表达阴性的结肠癌安排中PCNA的细胞增殖指数显着低于Livin基因表达阳性的安排（P <0.05）。 定论 Livin基因不只参加结肠癌的发病开展进程，并且还参加了断肠癌的部分侵袭和搬运的病理进程。Livin不只参加结肠癌细胞凋亡的调控，还促进了细胞的增殖进程，可作为大肠癌临床确诊、搬运和放化效果果及预后评价的灵敏目标。
[关键词] 结肠癌；免疫组化；Livin基因；细胞增殖
[中图分类号] R735.35 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）12-0085-03
[Abstract] Objective To discuss expression of inhibitor of apoptosis protein Livin in colon cancer tissue and its relationship with cell multiplication. Methods A total of 70 cases of postoperative pathological specimen of patients with colon cancer tissue were selected， and the expression of Livin genes was detected by S-P immunohistochemistry， whose relationship with gender， age， size of tumor， histological grade， inasie depth， lymphatic metastasis， distant metastasis and other biological behaviour and cell multiplication of patients were discussed. 30 cases of normal colonic tissue near tumor tissues were additionally selected as the research comparison. Results The positive expression rate of Livin genes in colon cancer tissue was much higher than that in normal colon tissue（χ2=12.19， P <0.01）. The expression level of Livin genes in colon cancer tissue has no relationship with gender， age， size of tumor and histological grade（P >0.05）. As the development of inasie depth of primary lesion， lymphatic metastasis and distant metastasis were showed the rising trend （P <0.01 or P <0.05）. The PCNA cell proliferation index in colon cancer tissue of Livin genes negative expression was much lower than that in Livin genes positive expression（P <0.05）. Conclusion Livin genes participate in not only the disease progression of colon cancer tissue， but also pathologic process of local invasion and transformation. Livin genes participate in not only the apoptosis control of colon cancer tissue， but also the boosting of processing of cell multiplication， which can be the clinical diagnosis， transformation， curative effect of radiotherapy and chemotherapy and reliable index of prognosis evaluation.
[Key words] Colon cancer tissue； Immunohistochemical； Livin gene； Cell multiplication
肿瘤的发作开展进程不只与细胞过度增生有关，并且与细胞的凋亡受按捺密切相关，细胞凋亡途径的调理妨碍及凋亡相关基因表达反常，均可导致肿瘤发作和开展。Livin基因属凋亡按捺蛋白（IAPs）宗族的按捺细胞凋亡新成员，挑选性表达于人的胚胎和大部分肿瘤安排，而在大部分正常人的终末分解安排中无显着表达或低表达[1，2]。有关Livin基因在结肠癌安排中的表达及临床含义近年来逐步引起临床注重，但其与患者生物学行为的联系现在国内外报导不一致[3，4]。本研讨调查了Livin基因在结肠癌安排中的表达，并开始评论其与患者生物学行为及细胞增殖的联系。现报导如下。endprint
1 材料与办法
1.1 一般材料
本研讨共选取了断肠癌患者术后病理标本70份。一切患者具有完好临床材料，术前均未进行任何方式的辅佐化疗、放疗和免疫治疗。70例患者中男43例，女27例；年纪34 ～87岁，均匀（65.4±7.6）岁。另取30例癌旁正常的结肠安排（距肿瘤边际5 cm以上的安排）作对照，其间男19例，女11例；年纪36 ～84岁，均匀（64.9±7.1）岁。两组在性别、年纪方面比较差异不显着（P>0.05），具有可比性。
1.2 免疫组化染色[5]
选用S-P免疫组化法进行染色检测。将手术标本进行白腊包埋，切片机接连4μm切片，选用柠檬酸盐高压抗原修正，正常血清阻断关闭10min，倾去血清滴加Livin和PCNA一抗工作液4℃冰箱中孵育过夜，余按说明书操作规范进行操作。用正常扁桃腺安排和磷酸盐缓冲液PBS行阳性或阴性对照。鼠抗人Livin单克隆抗体和鼠抗人PCNA单克隆抗体由北京中杉金桥公司供给。免疫组化S-P试剂盒由武汉博士德供给。
1.3 调查目标
1.3.1 Livin免疫组化成果断定[6] Livin阳性表达细胞是指细胞浆或细胞浆与细胞核均呈现黄色至棕褐色颗粒状染色。依照染色细胞的百分比判别免疫组化成果，其间细胞染色不显着或染色细胞的百分比≤10%为阴性（-）；染色细胞的百分比>10%为阳性（+）。
1.3.2 PCNA的细胞增殖指数的测定[7] 选用HPIAS-1000高清晰度五颜六色病理图文剖析体系，将PCNA染色阳性的每张免疫组化切片挑选10个高倍区域，选取1000个肿瘤细胞计数PCNA染色阳性细胞所占的份额即为PCNA的细胞增殖指数。
1.4 统计学处理
使用SPSS18.0软件，计量材料以（x±s）标明，选用t查验，计数材料用相对数标明，选用χ2查验，以P<0.05为统计学差异的规范。
2 成果
2.1 Livin基因在结肠癌及癌旁正常结肠安排中的表达差异比较
Livin基因主要在细胞浆中染色表达，部分患者也可见到细胞浆和细胞核均染色表达。70例结肠癌标本中Livin的染色阳性表达43例，阳性率为61.43%。30例癌旁正常结肠安排中Livin的染色阳性表达仅7例，阳性率为23.33%。结肠癌安排中Livin基因的阳性率显着高于癌旁正常结肠安排（χ2=12.19，P<0.01）。
2.2 Livin基因在结肠癌中的表达与患者生物学行为的联系
Livin基因在结肠癌安排中的表达水平与性别、年纪、肿瘤巨细及安排分解程度均无显着联系（P>0.05），随原发病灶的滋润深度、淋巴结搬运和远处搬运呈显着的上升趋势（P<0.01或P<0.05）。见表1和图1。
2.3 结肠癌安排中Livin基因的表达与PI的联系
Livin基因表达阴性的结肠癌安排中PCNA的细胞增殖指数为（32.578±9.23）%；Livin基因表达阳性的结肠癌安排中PCNA的细胞增殖指数为（58.21±12.05）%。Livin基因表达阴性的结肠癌安排中PCNA的细胞增殖指数显着低于Livin基因表达阳性的结肠癌安排（t=2.37，P<0.05）。
3 评论
结肠癌是现在全球发病率较高的胃肠道恶性肿瘤，其发病进程一般均经过了正常黏膜- 腺瘤-癌的开展进程，其间细胞凋亡途径及凋亡基因表达反常在结肠癌的发作、开展进程中起到极其重要的效果。Livin基因是近年来研讨发现IAPs宗族中的新成员，定坐落人染色体20号的q13.3处，长度7.6Kb，由7个外显子和6个内含子组成[8]。Livin基因的BIR结构域能与多种Caspase，尤其是Caspase-3、7和9结兼并相互效果，按捺活化的Caspase活性，阻断凋亡受体和以线粒体为中心的凋亡级联反响，然后按捺细胞的凋亡进程；别的Livin基因还能激活T AK1/JNK1信号传导途径，促进 TAK1介导的JNK1激活效应，终究启动了Livin基因的抗细胞凋亡效果，并能参加Wnt/-catenin信号通路转录后的调控，一起参加恶性肿瘤的发作、开展、预后和转归进程[9-12]。
近年来有关Livin基因在结肠癌安排中的表达及其发作、开展、预后和转归联系逐步引起临床的注重。王永等[13]研讨发现，Livin基因在大肠安排反常分解-癌前病变-癌安排发病阶段起到了极其重要的效果，参加大肠癌的发病进程，且Livin基因在直肠癌高表达，与大肠癌的病理学特征密切相关。本研讨成果发现，结肠癌安排中Livin基因的阳性率显着高于癌旁正常结肠安排，提示Livin基因参加结肠癌的发病与开展进程。李辰生等[14]研讨发现，直肠癌安排中Livin蛋白的表达与病理类型、临床分期和淋巴结搬运等生物学行为密切相关，是影响患者预后的重要目标。严红等[15]研讨发现，Livin基因在大肠癌安排中表达率较正常大肠安排高，且其阳性表达率与肿瘤的滋润深度、分解程度及临床分期等密切相关，可作为大肠癌临床确诊、搬运和放化效果果及预后评价的灵敏目标。本研讨成果发现，Livin基因在结肠癌安排中的表达水平与性别、年纪、肿瘤巨细及安排分解程度无关，随原发病灶的滋润深度、淋巴结搬运和远处搬运呈显着的上升趋势。提示Livin基因的表达不只与结肠癌发作和开展的进程密切相关，并且还参加了断肠癌的部分侵袭和搬运的病理开展进程，可作为影响患者预后的重要目标。汪海等[16]研讨发现，Livin基因在胃癌中的表达水平与PCNA的细胞增殖指数呈正相关，Livin基因促进了癌细胞的反常增殖进程。本研讨成果发现，Livin基因表达阴性的结肠癌安排中PCNA的细胞增殖指数显着低于Livin基因表达阳性的结肠癌安排。提示Livin在结肠癌中的表达与PCNA的增殖指数密切相关，标明Livin不只参加结肠癌细胞凋亡的调控，还促进了细胞的增殖进程。endprint
总归，Livin基因不只参加结肠癌的发病开展进程，并且还参加了断肠癌的部分侵袭和搬运的病理进程。Livin不只参加结肠癌细胞凋亡的调控，还促进了细胞的增殖进程，可作为大肠癌临床确诊、搬运和放化效果果及预后评价的灵敏目标[17]。
[参考文献]
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（收稿日期：2013-12-05）endprint
总归，Livin基因不只参加结肠癌的发病开展进程，并且还参加了断肠癌的部分侵袭和搬运的病理进程。Livin不只参加结肠癌细胞凋亡的调控，还促进了细胞的增殖进程，可作为大肠癌临床确诊、搬运和放化效果果及预后评价的灵敏目标[17]。
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